我经历的鬼峰在反向阶段lc我相信是由于潜在的溶剂混合的应用程序/脱气问题在积极快速梯度。
我运行当前的梯度是0.5分钟后注入水缓冲溶液100%后,积极增加到44.5% acetonitrile-based缓冲区在0.51分钟3.5分钟保存之后增加到100% acetonitrile-based缓冲超过1分钟5分钟保持列清洗。紫外检测在260 nm w /带宽4海里参考波长为360 w / 80海里的带宽
30分钟后清洗5毫升/分钟的缓冲线(以确保清除真空脱气装置按仪器手动)我已经完成了多个系统空白与下面的结果:
——一个运行正常的方法导致2峰保留时间为3.232和3.979,69.4和39.4,高度分别为5.2和1.7
——运行初始缓冲b坡道增加到60%导致2峰保留时间为3.073和3.635,地区56和50.4,高度分别为5.2和2.9
——运行初始缓冲b坡道增加到75%导致2峰保留时间为2.977和3.372,38.5和38.5,高度分别为4.4和3.2
——运行通过毛细管与列绕过只有一个负峰时间1.361,26.3,2.2的高度
总之,运行与列导致更大的第二高峰acetonitrile-based缓冲区的初始增加的比例也增加,导致我相信高峰期间由于攻击性混合协议。
峰形状附列时符合文献关于出气问题2“鱼翅峰形状”,峰很尖锐的前缘与线性下降回到基线(尽管这些山峰从来没有回到基线)。
不幸的是这些山峰不一致的任何运行一个简单的空白减法将为这个特定的方法是不够的
我希望得到一些建议方法确认在线脱气器的本征函数,添加背压后列,以防止脱气如果实际上是这个问题,或任何其他方法,为消除鬼峰在过去工作。
