跳转到主要内容
  1. 家
  2. 产品
  3. 细胞分析
  4. 如何运行一个分析

如何运行一个分析

前

对于一个成功的试验程序、技术和资源

这个学习中心旨在介绍海马XF试验工作流程,关注过程和技术,以确保最佳XF分析绩效和成果。当你阅读每个部分,程序是指使用安捷伦海马XF雷竞技raybet实时ATP率测定细胞能量表型测试执行初始细胞特征。这里描述的技术适用于所有海马XF化验,如播种贴壁细胞,加载注入端口,等等。只会改变根据你所需的耗材XF分析器模型和XF化验设备。使用下拉菜单中选择您的XF分析器,然后单击一个小节来显示相关内容的这一步XF分析工作流。

选择一个步骤来显示内容

1。收集XF化验材料

2。准备你的XF化验

3所示。设置您的XF化验

4所示。运行您的XF化验

5。分析XF化验结果

6。除了基础知识

1。收集XF试验材料

本节列出设置XF试验所需材料。

1.1要求安捷伦材料雷竞技raybet

1.2其他所需材料

1.1要求安捷伦材料雷竞技raybet

相关的支持材料

参考资料

海马工具包

1.2其他所需材料

其他所需材料

  • 37°C non-CO2孵化器
  • 细胞计数器/血细胞计数器
  • 37°C水浴
  • 蒸馏或无菌H2O
  • 倒Brightfield显微镜
  • 触摸涡
  • 15 - 50毫升锥形管
  • P200 P1000 8 P200吸液管和/或12频道
  • P200 P1000 8频道P200吸量管
  • 试剂水库

推荐材料

  • 离心机与适配器细胞培养板(如果需要使用悬浮细胞类型)
  • 微型离心机
  • 校准酸度计*
  • 搅拌板*
  • 无菌过滤瓶(0.22μm过滤器)和帽*
  • 1.0 N氢氧化钠溶液*

(*如果使用这些产品是需要分析媒体除了海马XF DMEM pH值7.4或海马XF RPMI pH值7.4)

相关的支持材料

参考资料

海马工具包

只显示信息海马

改变仪器类型

2。准备你的XF化验

本节将重点介绍制备技术的前一天XF化验,包括指导选择细胞播种密度、播种技术贴壁细胞XF组织培养板和保湿XF墨盒。

本节着重于前一天准备技术试验,包括指导选择细胞播种密度、播种技术贴壁细胞XFp组织培养板和保湿XFp墨盒。

选择一个工作流步骤显示帮助内容。

2.1选择播种Densitiy

2.2种子细胞

2.3水合物墨盒

2.3水合物墨盒

2.4设计实验

2.1选择播种Densitiy

选择细胞播种密度的基本程序

有效地检查使用安捷伦海马代谢和生物能量学功能雷竞技raybet细胞外流量分析仪,分析仪,有必要首先描述一个特定的细胞类型对其代谢活动在基底和最大呼吸(OCR)和细胞外酸化(ECAR)。海马XF实时ATP率试验测试设备海马XFp实时ATP率试验测试设备可以用来描述细胞系/类型的兴趣一个试验。两个短的化验。

优化细胞种子数量不同的细胞类型,但通常之间5 x 103和4 x 104每对细胞贴壁细胞。悬浮细胞需要更高的播种密度从5 x 1042 x 105细胞每根据细胞类型。1 x 104和8 x 104细胞每口井。一般来说,密度导致50 - 90% confluency生成代谢率在理想的/仪器的动态范围。

请查阅雷竞技raybet安捷伦细胞分析出版数据库和/或XF出版数据库为细胞提供一个初始起点密度值特定于您的需要。

海马工具包

选择细胞播种密度的基本程序

有效地检查代谢和生物能量学函数使用安捷伦海马细胞外流量分析器,必须首先描述一个特定的细胞类型对其代谢活动在基底和最大呼吸(OCR)和细胞外酸雷竞技raybet化(ECAR)。海马细胞能量表型检测组件可以用来描述细胞系/类型的两个短化验的兴趣

优化细胞种子数量不同的细胞类型,但通常在1 x 104和8 x 104细胞每口井。一般来说,密度导致50 - 90% confluency生成代谢率在理想的/仪器的动态范围。

请查阅海马细胞参考数据库和/或XF出版数据库为细胞提供一个初始起点密度值特定于您的需要。

相关的支持材料

参考资料

2.2种子细胞

播种贴壁细胞的基本程序(通常是前一天XF执行的pHS迷你分析)

对于每个密度测试,种子作为粘附细胞的定向。视图说明播种悬浮细胞。

雷竞技raybet安捷伦海马XFpHS迷你分析执行安捷伦海马雷竞技raybet96年好24-well8-wellXFpHS迷你细胞培养微型板块Miniplate结合一个XFe96传感器盒。本程序描述建议播种粘附细胞类型使用安捷伦海马分析仪。雷竞技raybet视图说明播种悬浮细胞。

四种不同细胞密度的方法使用一个XF96细胞培养板、XFe96墨盒和海马XF实时ATP率试验设备仪器推荐初步分析。

方法测试四种不同细胞密度和四种不同浓度FCCP使用两个细胞培养板、两个墨盒和XF细胞能量表型检测组件与乐器建议最初的化验。

测试四种不同细胞密度的方法使用一个XF24细胞培养微型板块,XFe24传感器盒和海马XF实时ATP率试验设备和乐器建议最初的化验。

测试2 - 4不同细胞密度的方法使用一个XFp细胞培养Miniplate, XFp墨盒和海马XF实时ATP率试验装备的XFp仪器XF HS迷你分析仪建议首次化验。

这是一个建议XF96试验板地图播种四个细胞密度:

试验板xf96地图

播种滴定法测定细胞密度

这是一个建议的播种试验板地图四细胞密度:

板XF24地图
板图设计XFe24

播种FCCP浓度滴定分析

如果您已经执行细胞播种密度测定和/或知道每口井的最优数量的细胞,FCCP滴定测定可能使用最优执行细胞数(1.0 X细胞/)播种在所有除了背景校正井井。否则,遵循相同的指令细胞播种和盒式水合/准备如下所示,测试和使用以下建议板布局四个FCCP浓度:

板图设计XF24

有两个工作流选项:(1)细胞数量有限,多个XFp细胞培养miniplates可以在不同播种密度减少实验并完成描述工作流之间的时间更快(加速工作流)。(2)细胞数量有限,额外的细胞准备后第一个实验的结果(标准工作流)决定的。

实验 基本原理 加速工作流程 标准工作流程
种子细胞在单一或不同密度和视觉评估程度的细胞融合;选择一个miniplate下一步。 生成代谢率仪器的动态范围内,细胞应该汇合的50 - 90%。视觉评估是一个很好的第一近似最佳的细胞密度,并将在每个试验验证。 种子1 - 2 miniplates根据如下图2 - 4不同密度。 种子1 miniplate单个细胞密度;水合物1 XFp盒。
板XFp地图
  • 选择2 - 4细胞密度测试,基于上述标准或加速工作流。覆盖范围中找到上面的引用,或者推荐的种子细胞/价值(1 x) + 0.5 x, 2和4 x细胞/。
  • 删除一个三包miniplates的蓝色盒子。
  • 从浴缸里去掉箔密封(s)将被使用。
  • 添加无菌水或PBS细胞培养井周围的护城河。使用摘要吸移管管理器设置为200μL,填补双方的护城河(两个技巧将适合每个室)。如果没有可用的多渠道吸管,填满每室的护城河400μL无菌水或PBS(总3200μL)。
  • 增加80μL只生长培养基(无电池)井和h .这些都是背景校正井。
  • 收获和re-suspend细胞所需的最终浓度在80年种子μL生长介质。优化细胞播种数字相差很大,尽管通常5×10之间3- 4×104细胞每口井,必须根据经验。(例如,1 x 104细胞每口井,resuspend细胞1 x 104每80μL = 1.25 x 105细胞每毫升)
海马工具包

播种贴壁细胞的基本程序(通常是前一天XF执行的分析)

  • 一个两步播种过程建议当播种安捷伦海马XF24细胞培养微型板块。雷竞技raybet两步过程产生一致甚至单层细胞。
  • 收获和re-suspend细胞所需的最终浓度在80年种子μL生长介质。优化细胞播种数字相差很大,尽管通常5×10之间3- 4×104细胞每口井,必须根据经验。(例如,1 x 104细胞每口井,resuspend细胞1 x 104每80μL = 1.25 x 105细胞每毫升)
  • 收获和re-suspend细胞所需的最终浓度在100年种子μL生长介质。优化细胞播种数字相差很大,不过通常在1×104- 8×104细胞每口井,必须根据经验。(例如,2 x 104细胞每口井,resuspend细胞2 x 104每100μL = 2.0 x 105细胞每毫升)
  • 种子80μL细胞悬液;没有种子细胞背景校正井(A1, A12, H1, H12)。一定要把介质只在背景校正井(无电池)。
  • 种子80μL细胞悬液在井B - G,不种子细胞背景校正井(A股和H)。一定要把介质只在背景校正井(无电池)。
  • 种子100μL细胞悬液;没有种子细胞背景校正井(A1, B4, C3, D6)。一定要把介质只在背景校正井(无电池)。
  • 重要:允许板在室温下的组织培养罩一个小时。1这甚至可以促进细胞分布,减少边缘效应对一些细胞类型。使用显微镜监测依从性。
  • 放置在一个标准的细胞培养板孵化器允许细胞遵循。这通常需要大约1小时强贴壁细胞,但可能需要5 - 6小时不粘附细胞类型。使用显微镜监测依从性。
  • 一小时休息后一步,检查依从性的细胞。
  • 如果细胞well-adhered,分发额外150μL的细胞生长媒体(250µL总),然后板转移到一个标准的细胞培养孵化器。
  • 如果细胞不well-adhered板,允许一个额外的1 - 5小时细胞连接(在生物安全柜),然后添加一个额外的150增长µL媒体(250µL总)和板转移到一个标准的细胞培养孵化器。
  • 细胞粘附后,增加150μl生长介质的,总数250μl介质的体积。当添加介质井,慢慢添加到双方不要打扰新连接的细胞。
  • 允许细胞培养的细胞生长在一夜之间孵化器。使用显微镜监控细胞的生长和健康。

1 Lundholt BK,飞毛腿公里,Pagliaro l .一个简单的技术,减少边缘效应细胞化验。J Biomol屏幕。2003年10月,8 (5):566 - 7

播种悬浮细胞的基本程序(通常执行的日子XFpHX迷你分析)

分析non-adherent细胞(如T细胞白血病细胞系,等等)使用XF技术需要固定细胞井的底部。这是通过与保利D-lysine涂层(PDL)或Cell-Tak底部的。雷竞技raybet安捷伦提供现成的PDL-coatedXFe96 / XF96XFp细胞培养微型板块。验证,推荐使用XF T细胞活化分析T细胞。Prewarm即食PDL板块在37°C non-CO2孵化器一夜之间用于播种前细胞(最少6小时)。

播种悬浮细胞通常是执行当天XF化验,点击查看说明播种悬浮细胞。

如果想Cell-Tak涂层,Cell-Tak涂层做准备XFe96 / XF96XFp细胞培养板(s)如下所述:

  • 最优Cell-Tak溶液浓度对安捷伦海马细胞培养雷竞技raybet微型板块Miniplate是22.4μg /毫升。
  • 准备2.5毫升1.5毫升0.25毫升这个解决方案的每个试验每板。参考制造商的协议准备这个解决方案。
  • 应用2550μL解决方案的每个20分钟在室温下。
  • 洗每使用200μL无菌水的两倍。
  • Cell-Tak-coated海马细胞培养微型板块Miniplates可能存储在4°C 1周。
  • Cell-Tak涂细胞培养微型板块Miniplates细胞培养微型板块必须允许温暖到室温前罩细胞播种。

相关的支持材料

参考资料

2.3水合物墨盒

保湿墨盒的基本程序

一个重要的组件的XFpHS迷你试验平台是传感器盒。每个探测的传感器盒发现与固态传感器材料,可以改变pH值和O2浓度随时间变化来计算利率。为了使传感器正常工作,他们必须彻底水化。

XF前的那一天pHS迷你分析:

  • 整除至少20毫升的XF Calibrant 50毫升锥形管。把这个non-CO2一夜之间37°C的孵化器。
  • 整除至少5毫升的XF Calibrant 15毫升锥形管。把这个non-CO2一夜之间37°C的孵化器。
  • 打开细胞外流量分析工具和删除内容。
  • 获得一个三包墨盒的绿色盒子。从浴缸里去掉箔密封(s)将被使用。
  • 把传感器盒颠倒在工具板。
  • 独立的公用事业板块和传感器盒,和地点旁边的传感器盒颠倒工具板。
  • 实用程序的每个好板填充200μL无菌,组织文化品位的水。
  • 填满在井外的护城河400µL每室。
  • 降低传感器盒到公用事业板块,传感器在水淹没。
  • 检查水位足够高保持传感器淹没。
  • 在一个non-CO2一夜之间37°C的孵化器。防止水的蒸发,验证孵化器是适当的湿润。
  • 打开安捷伦海马通量雷竞技raybet分析工具和删除内容。
  • 将传感器盒上下颠倒的旁边的公用事业板块。
  • 填满每一个公用事业板块,1毫升的XF Calibrant。
  • 将水力推进器的公用事业板块。
  • 降低传感器盒通过水力辅助板上的空缺,为公用事业板块淹没在XF Calibrant传感器。
  • 降低传感器盒到公用事业板块,传感器在水淹没。
  • 验证XF Calibrant水平高到足以保持传感器淹没。
  • 在一个non-CO2一夜之间37°C的孵化器。XF Calibrant防止蒸发,孵化器应湿润。
  • 重要提示:水电助推器必须被移除之前将传感器盒到安捷伦海马分析仪。雷竞技raybet未能这样做可能会导致损坏传感器盒和分析器。看到第三节进一步指示。

相关的支持材料

参考资料

2.4设计实验

波桌面软件允许您轻松地创建和定制分析模板文件上运行海马分析仪。

什么是分析模板文件?认为分析模板文件的电子副本实验你在实验室设计的笔记本。输入的信息在你的分析模板文件存储的记录实验在结果文件中,可以由你或其他合作者共享&重新运行,提供结构和组织你的结果数据分析完成后,并且在需要的时候提供了有价值的故障诊断信息。

3元素的分析模板文件是:

  1. 组定义
  2. 板图
  3. 仪器协议

组定义

  1. 开波2.6软件
  2. 点击模板(下面波回家)
  3. 打开检测模板XF实时ATP率测定
  4. 在组定义视图中,您将看到注射填充信息策略、预处理、分析媒体和细胞类型。
  5. 双击环境激素和删除及控制实验条目。
XF96模板选择
XF24模板选择
XFp模板选择图标
  1. 双击细胞类型和删除默认条目叫做细胞(见雷竞技raybet安捷伦细胞分析出版数据库)。
  2. 在细胞类型组定义,点击细胞类型和添加添加一个新的细胞类型条目并输入细胞类型的名字你打算在你的化验分析。建议添加播种密度组名。例如,C2C12细胞类型播种密度的20000细胞/将命名为:20 k C2C12

    对每个单元类型定义重复3次。

    注意:由于XFe24分析仪的24-well微型板块格式,这个细胞播种密度优化协议可以使用1细胞板4细胞进行播种密度每组(n = 5)。由于XFe96分析仪的96孔酶标格式,这个细胞播种密度优化协议可以使用1细胞板4细胞进行播种密度每组(n = 22 - 24)。由于分析仪的8-well miniplate格式,这个细胞播种密度优化协议必须执行使用两个细胞板和2细胞播种密度每板每组(n = 3)。在设计你的分析模板,您可以:
    • 创建一个新的分析模板3日和4日细胞播种密度组。
    • 添加4细胞播种密度组一个分析模板,重新分配3日和4日细胞组板图与细胞执行第一个试验后播种密度组1和2。
    • 重命名组在此模板执行第一个试验与细胞播种密度组1和2。
组定义XFe96
组定义XFe24
XFp组定义倒塌
  1. 一旦完成命名组,单击生成组和波将自动创建4独特的分析组。注意到组名称包括简化的细胞类型和播种密度板地图任务。
    下一步是指定组板图。

板图

  1. 点击板图在函数丝带(在“分析导航”)。
  2. 指定第一个单元格播种密度组板图。分配一组板图,第一组中单击组名称列表,然后:
    • 单击列标题(即:1、2、3等)或行标题(即A, B, C,等等)。
    • 拖放和面积井使用鼠标左键点击地图上的盘子。
    • 单击板上的个别井地图。
  3. 重复下一个细胞播种密度组。建议板块下面上图/地图的布局。
板XFe96地图
细胞密度XFe96
XFe24板地图倒塌
XFp板地图倒塌
板XFe24地图
板XFp地图

仪器协议

  1. 点击仪器协议丝带的函数(在“分析导航”)来查看或编辑仪器协议。

    注意:默认仪器协议不需要修改,但是你可以改变一个协议命令的名称,注射前后测量的数量,或执行每个测量的时间。
    • 修改仪器协议设置直接影响如何期间获得试验数据。对于这个示例,使用默认仪器协议(推荐)。
    • 你应该需要修改默认仪器协议,执行你的手机之前播种密度优化分析建议复习中的仪器协议部分波用户指南,或者如果有必要,安捷伦细胞分析技雷竞技raybet术支持联系。
仪器协议XFe96
仪器协议XFe24
仪器协议XFp
  1. 最后,单击运行试验丝带的函数(在“分析导航”)添加额外的实验细节,保存模板文件,并启动细胞播种密度优化分析。
  2. 点击运行试验丝带的函数(在“分析导航”)添加额外的实验细节和保存模板文件。
  3. 分析模板文件转移到XFp分析器步骤中列出XFp细胞外通量用户指南执行第一个细胞播种密度优化分析。
  4. 分析模板文件转移到XF HS迷你分析器步骤中列出XF HS迷你细胞外通量用户指南执行第一个细胞播种密度优化分析。
XFe96审查和运行
XFe24审查和运行
XFp审查和运行

相关的支持材料

海马工具包

只显示信息海马

改变仪器类型

3所示。设置您的XF化验

本节关注技术执行的日子你的XFp分析,包括分析媒体准备。播种non-adherent细胞,加载XFp传感器盒注射端口与解决方案。

选择一个工作流步骤显示帮助内容。

3.1准备弹药和媒介

3.2清洗细胞

3.3组装注射方案

3.4加载解决方案

3.1准备弹药和媒介

准备墨盒

  • 消除calibrant的锥形管和传感器盒组装工具板的孵化器。
  • 把传感器盒颠倒在工具板。
  • 删除和丢弃的水工具板。
  • 实用程序的每个好板填充200μL预热XF Calibrant。
  • 填满在井外的护城河400μL XF Calibrant每室。
  • 降低传感器盒到公用事业板块,淹没calibrant的传感器。
  • 地方组装传感器盒non-CO工具板237°C孵化器为45 - 60分钟之前加载传感器盒的注射端口。
  • 拆卸组装传感器盒与水电助推器和公用事业板块的孵化器。
  • 把传感器盒颠倒在工具板。
  • 删除和丢弃水电助推器。
  • 降低传感器盒到公用事业板块,淹没calibrant的传感器。
  • 返回组装传感器盒与效用non-CO板237°C孵化器直到所需加载传感器盒的注射端口。

允许组装传感器盒与公用事业板块non-CO孵化237°C孵化器直到所需加载传感器盒的注射端口。

海马工具包

准备XF试验介质

海马化验需要特定媒体准确、一致的功能代谢活动测量。

雷竞技raybet安捷伦提供现成的、低缓冲媒体,pre-adjusted pH值7.4,与兼容的补充剂,可以简化试验准备和提供一致的试验条件。查看订单信息在这个现成的XF分析媒体系统或下载媒体选择指南。

另外,研究人员可以制定媒体组合相匹配所使用的分析工具。所有的作品都可以准备使用安捷伦的海马XF媒体和添加不同的基质/缓冲由特定的试验设计,下面的例子是雷竞技raybet海马XF实时ATP率测定细胞能量表型测试。

准备以下XF分析媒介使用与海马XF实时ATP率试验设备。

研究人员应该制定XF分析媒体组合匹配所使用的分析工具。所有的作品都可以准备使用安捷伦的海马XF媒体和添加不同的基质/缓冲由特定的试验设计,下面的例子是雷竞技raybet海马XF实时ATP率试验设备细胞能量表型测试。

准备以下XF分析媒介使用与细胞能量表型测试。

雷竞技raybet安捷伦试剂/安捷伦零件号码 最终浓度 体积
海马XF DMEM培养基,pH值7.4a、b/ 103575 - 100或
海马XF RPMI介质,pH值7.4a、b/ 103576 - 100		 XF基础培养基(w /酚红)a、b/ 103335 - 100或
XF RPMI (w /酚红)a、b/ 103336 - 100		 XF基础培养基(w /酚红)a、b/ 103575 - 100或
XF RPMI (w /酚红)a、b/ 103576 - 100		 - - - - - - 97.0毫升 9.70毫升
海马XF葡萄糖(1.0方案)/ 103577 - 100 10毫米 10μL 1.0毫升 100年μL
海马XF丙酮酸溶液(100毫米)/ 103578 - 100 1毫米 1.0毫升 100年μL
海马XF谷酰胺解决方案(200毫米)/ 103579 - 100 2毫米 1.0毫升 100年μL
一个XF DMEM和RPMI介质,pH值7.4 pre-adjusted pH值,不需要调整pH值对添加XF补充剂。见下面的方法制备。海马XF DMEM培养基pH值7.4和RPMI介质,pH值7.4不兼容XF24分析仪。
b准备使用替代的XF媒体类型准备使用替代的XF媒体类型准备使用替代的XF媒体类型准备使用替代的XF媒体类型准备使用替代的XF媒体类型。

基本程序准备XF DMEM培养基pH值7.4或XF RPMI介质pH值7.4

基本程序准备XF基地中酚红排泌量(w / o)或XF RPMI (w / o酚红)

设备要求:

  • 37°C水浴
  • 校准酸度计
  • 搅拌盘
  • 无菌过滤瓶(0.22μm过滤器)和帽子
  • 1.0 N氢氧化钠溶液

雷竞技raybet安捷伦海马XF DMEM培养基pH值7.4和XF RPMI介质pH值7.4旨在提供:

  • 方便:不需要调整最后的pH值与安捷伦海马XF补充推荐使用。雷竞技raybet
  • 一致性:低浓度的消息灵通的缓冲区(5毫米,DMEM;1毫米,RPMI)提供更加一致的XF数据。
  • 定量:使用试验中固定缓冲容量允许定量测定质子流出速率(每)。
  1. 温暖适当体积的XF DMEM培养基pH7.4或XF RPMI介质pH值7.4 - 37°C在无菌瓶。一般来说,100毫升是满足一个盘子。
  2. 温暖的适当体积的XF基地中酚红排泌量(w / o)或XF RPMI酚红排泌量(w / o) 37°C在无菌瓶。一般来说,100毫升是充分XF24板。
  3. 添加适当的海马XF补充剂(XF葡萄糖溶液,XF丙酮酸溶液和XF谷酰胺溶液)显示在上面的表中。
  4. 调整介质的pH值7.4使用1 N氢氧化钠。注意:pH值会改变很快添加氢氧化钠,使用小卷和添加慢慢调节pH值。
  5. 消毒试验介质0.2μm过滤器。
  6. 孵化最后XF试验介质在37°C到可以使用了

相关的支持材料

参考资料

3.2清洗细胞

基本程序洗涤贴壁细胞

贴壁细胞播种前至少一天XFpHS迷你分析:

  • 检索细胞培养迷你板的有限公司2孵化器。
  • 观察细胞在显微镜下:
    1. 确认细胞健康,形态、播种均匀性和纯度(没有污染)。
    2. 确保与一致的单层细胞粘附,。
    3. 确保没有细胞背景校正井。
  • 洗贴壁细胞与完整的试验介质:一次与XF实时ATP测定媒体:
    1. 删除所有但20μL培养基从每个。少量的介质是防止细胞干燥。
    2. 温柔的把200μL试验介质。
    3. 把板在37°C孵化器有限公司2一小时前化验。
    1. 删除所有但50μL培养基从每个。少量的介质是防止细胞干燥。
    2. 轻轻地加1毫升的试验介质。
    3. 把板在37°C孵化器有限公司2一小时前化验。
    4. 重复步骤b,清除一切但是50μL(步骤一)。
    5. 增加450μL试验介质(总量500μL)为24井平台工具。
    6. 就开始试验之前,洗细胞再与XF实时ATP测定媒体:删除所有媒体但50μL和添加新的媒体500μL最后一卷。检查细胞在显微镜下确保不干扰或冲走。
  • 就开始试验之前,洗细胞再与XF实时ATP测定媒体:删除所有媒体但20μL和添加新的媒体180μL最后一卷。检查细胞在显微镜下确保不干扰或冲走。
  • 在显微镜下观察试验井,确保细胞没有被冲走。
  • 把板放在一个37°C孵化器没有公司2一小时前化验。

播种悬浮细胞的基本程序

最佳的细胞密度对悬浮细胞在细胞大小而异。一般来说,最佳的细胞播种密度会导致细胞分布以及单层confluency在70 - 90%。强烈鼓励检查细胞分布在显微镜下寻找细胞之间(1)足够的空间以确保所有细胞接触涂层表面均匀和(2)确保最小的细胞群。播种过量细胞的数量高于最优密度或者细胞聚集在一起会导致糟糕的细胞粘附和导致不准确的速度测量。

细胞图像
答:图片显示的是低端的最佳细胞密度,理想的播种密度和分布。
B细胞图像
B:图像显示高端最佳播种密度,可以看到一些细胞集群。
  • 海马细胞培养微型板块,转移一个适当的细胞悬液的体积增长船锥形管。
  • 计算所需的细胞总数,每口井的所需的细胞的数量乘以海马XFe96 100口井。(例如,150000细胞/×100井= 1.5×107细胞)。
  • 计算所需的细胞总数,每口井的所需的细胞的数量乘以10井的海马。(例如,150000细胞/×10井= 1.5×106细胞)。
  • 在室温下离心细胞在200 g×5分钟。
  • 细胞被离心机时,吸管50μL试验介质的背景/控制井prewarmed PDL-coated海马XF96细胞培养微型板块或Cell-Tak-coated海马XF96细胞培养板。
  • 细胞被离心机时,吸管50μL试验介质为背景/校正井(A股和H) prewarmed PDL-coated海马XFp细胞培养微型板块或Cell-Tak-coated海马XFp细胞培养板。
  • 从离心机中除去浮在表面的锥形管。
  • Resuspend细胞热试验中所需的浓度的细胞每50μL试验介质。(例如,1.5×105细胞每口井,resuspend细胞体积,导致1.5×105细胞/ 50μL或3.0×106细胞/毫升)。
  • 刹车更改离心机设置为零。
  • 将细胞悬液转移到无菌组织培养水库,或者从锥形管吸管。
  • 吸管50μL细胞悬液的每一侧的好,除了背景/控制井。建议使用多通道吸管。
  • 把miniplate (s)在300 x XFp承运人托盘和离心机g 1分钟没有刹车。运营商是为了容纳3 miniplates,和符合标准离心机微型板块适配器。确保适当的离心机转子平衡。
  • 离心后,视觉上确认依从性细胞的底部。
  • 离心机在200×g细胞(0制动)1分钟。确保离心机是大致平衡的。
  • 小心不要扰乱细胞在底部,轻轻增加130μL试验中每个好所需的初始分析卷(180μL开始测定体积)。
  • 添加无菌水或PBS细胞培养井周围的护城河,100μL每室。使用摘要吸量器(如果可用)设置为50μL,填补双方每室使用两个技巧的护城河。如果没有可用,多渠道吸管单独填满护城河的每个室100μL无菌水或PBS(总800μL)。
  • 板转移到37°C孵化器不补充有限公司225 - 30分钟,以确保细胞完全连接。直观地证实,大多数细胞表面稳定坚持文化。
  • 慢慢的,轻轻的,增加130μL温暖试验中每一侧的。小心避免扰乱细胞。
  • 观察细胞在显微镜下检查不分离。
  • 细胞板返回到孵化器15 - 25分钟。
  • 15 - 25分钟后,细胞板准备好你的分析。总时间后离心不应该大于1小时,等待最好的结果。
  • 海马XF24细胞培养微型板块,转移一个适当的细胞悬液的体积增长船锥形管。
  • 计算所需的细胞总数,每口井的所需的细胞的数量乘以海马XF24 25井。(例如,每口井的150000个细胞×25井= 3.75×106细胞)。
  • 在室温下离心细胞在200 g×5分钟。
  • 细胞被离心机时,吸管100μL试验介质为背景/控制井的室温Cell-Tak-coated海马XF24细胞培养板。
  • 从离心机中除去浮在表面的锥形管。
  • Resuspend细胞热试验中所需的浓度的细胞每100 uL的测定中。(例如,1.5×105细胞每口井,resuspend细胞体积,导致1.5×105细胞/ 100μL或1.5×106细胞/毫升)。
  • 刹车更改离心机设置为零。
  • 将细胞悬液转移到无菌组织培养水库,或者从锥形管吸管。
  • 吸管100μL细胞悬液的每一侧的好,除了背景/控制井。雷竞技raybet安捷伦建议使用多通道吸管。
  • 离心机在200×g细胞(0制动)1分钟。确保离心机是大致平衡的。对于XFp分析仪用户来说,安捷伦建议使用安捷伦海雷竞技raybet马XFp承运人托盘海马XFp细胞培养Miniplates离心机。更多细节,请参阅基本过程:播种XFp悬浮细胞细胞培养Miniplates。
  • 板转移到37°C孵化器不补充有限公司225 - 30分钟,以确保细胞完全连接。直观地证实,大多数细胞表面稳定坚持文化。
  • 慢慢的,轻轻的,增加400μL温暖试验中每一侧的。小心避免扰乱细胞。
  • 观察细胞在显微镜下检查不分离。
  • 细胞板返回到孵化器15 - 25分钟。
  • 15 - 25分钟后,细胞板准备好你的分析。总时间后离心不应该大于1小时,等待最好的结果。

相关的支持材料

参考资料

3.3组装注射方案

安捷伦海马分析器的一个关键特性是能够注入试雷竞技raybet剂在测定和实时看到结果。这是通过分发解决方案已经加载到注射器筒内港口前放置在仪器。

如果执行初始细胞特征的细胞密度和/或FCCP滴定用表型测定细胞能量,准备注入方案如下表中所描述的。

如果执行初始细胞特征的细胞密度使用海马XFp实时ATP率测定,准备注入方案如下表中所描述的。

如果执行初始细胞特征的细胞密度使用海马XF实时ATP率测定,准备注入方案如下表中所描述的。

细胞密度滴定分析解决方案组装

FCCP浓度滴定分析解决方案组装

  • 移除一个袋从海马海马XF实时ATP率测定工具盒,和删除两管(低聚糖和鱼藤酮+抗霉素A)。
  • 移除一个袋从海马XF细胞能量表型检测组件盒,两管(低聚糖和FCCP)和删除。
  • 使用吸管,resuspend每个管与准备的内容分析中使用下表中描述的卷。管,放置一个上限和涡1分钟溶解的化合物。
再悬浮量的海马XF实时ATP率试验设备
复合 XF分析媒体的体积 导致股票浓度
寡霉素 420年µl 168年µl 150年µM 75年µM
鱼藤酮+抗霉素A 540年µl 216年µl 50µM 25µM
再悬浮量XF细胞表型检测组件
XF细胞能量表型测试组件 卷XF分析媒体(μL) 导致股票浓度(μM)
寡霉素 630年 One hundred.
FCCP 720年 One hundred.
  • 准备3.0毫升注射溶液通过结合适当的XF卷分析媒体和股票寡霉素和股票鱼藤酮/抗霉素A如下表中所描述的。
  • 使用15毫升锥形管,准备3.0毫升注射溶液通过结合适当的XF卷分析媒体、股票寡霉素和股票FCCP如下表中所描述的。
  • 准备300µL每个注入的解决方案结合适当的XF卷分析媒体和股票寡霉素和股票鱼藤酮/抗霉素A如下表中所描述的。
充分稀释XF实时ATP分析工具——细胞特征
港口和复合 股票数量 XF分析媒体音量 10倍(港口) (完井)
港口一个寡霉素 300年µl 60µl 2700年µl 240年µl 15µM 1.5µM
端口B鱼藤酮+抗霉素A 300年µl 60µl 2700年µl 240年µl 5µM 0.5µM
稀释的卷XF细胞能源表型检测组件——细胞播种密度与XFe24 / XF24滴定
最后FCCP浓度 卷分析媒体(μL) 卷的股票寡霉素(μM) 卷的股票FCCP(μL) 10 x最终益生元(港口)浓度(μM) 最后10 x FCCP(港口)浓度(μM)
0.25 875年 One hundred. 25 10 2.5
0.5 850年 One hundred. 50 10 5。0
1。0 800年 One hundred. One hundred. 10 10
2.0 700年 One hundred. 200年 10 20.

如果执行不同类型的XFpHS迷你分析,请参考适当的XFpHS迷你设备用户指南适当注入解决方案准备指令。

相关的支持材料

参考资料

3.4加载解决方案

如果执行初始细胞特征(细胞密度测定)使用海马XF实时ATP率测定,按照下面的说明和表加载筒注射端口。

如果执行初始细胞特征(细胞密度和FCCP浓度滴定法测定)使用能量细胞表型分析,按照下面的说明和表加载筒注射端口。

注意,对于这些试验设计,只有一个和B将使用注射端口。

传感器盒注射口布局

  • 去除水分从non-CO墨盒2孵化器。
  • 东方安捷伦海马XF测定雷竞技raybet盒。行标签(有学问的a -)。三角缺口将在左下角。
  • 东方安捷伦海马XF测定雷竞技raybet盒。行标签(有学问的模拟)。三角缺口将在左下角。
  • 东方安捷伦海马XFp测雷竞技raybet定盒。地方好标签(字母a)到左边。三角缺口将在左下角。
  • 使用100或200μL吸管(多路),确保提示(s)安全地安装到吸管。位置吸管提示(s)(装满你的化合物注射)所需的端口,和东方的技巧非常微小的角(< 5°)。不要强迫技巧完全入洞中。
港口布局
XF24 TPort布局
  • 将A / D加载引导平试验筒的顶部。东方加载引导字母“A”是位于左上角。用指尖持有的外边缘加载引导加载期间稳定所以吸管技巧不驱逐加载指南。
  • 使用一个10 - 100μL多通道吸管,确保安全地安装到吸管技巧。位置吸管技巧(装满你的化合物注射)所需的列加载指南,和东方建议在一个非常小的角度。插入的技巧尽可能不抵抗到洞和分发。不要强迫技巧完全入洞中。
  • 建议在45°角。把技巧一半放入注入端口的斜角提示对进样口的对面墙上。
  • 不完全插入技巧的底部注入港口,因为这可能导致复合泄漏通过端口。
  • 轻轻给20μL适当的注入方案根据板/组到港口布局如下所示。撤回港口的建议仔细稳定加载引导整个过程。避免产生气泡。不利用任何部分的墨盒,试图缓解气泡。这可能导致解决方案从进样口泄漏。
  • 轻轻给55μL适当的注入方案根据板/组到港口布局所示,这取决于试验正在进行。撤退的建议仔细港口。避免产生气泡,但不要点击任何部分的墨盒,试图缓解气泡。这可能导致解决方案从进样口泄漏。
  • 轻轻给20μL适当的注入方案根据板/组到港口布局如下所示。退出的提示(s)仔细港口,整个过程稳定墨盒。避免产生气泡。不利用任何部分的墨盒,试图缓解气泡。这可能导致解决方案从进样口泄漏。
  • 删除A / D港口装载指南,并替换为B / C港口装载指南,左上角的“B”。重复步骤负载端口B以上,使用22µl注入的解决方案。
  • 重复步骤负载端口B以上,使用62µl注入的解决方案。
  • 重复步骤负载端口B以上,使用22µl注入的解决方案。
  • 视觉检查注射端口甚至加载。液体应在港口,确保没有剩余下降筒的顶部。

注射口加载滴定法测定细胞密度

实时注入端口和卷XF ATP分析工具——细胞特征
港口和复合 体积 10倍(港口) (完井)
港口一个寡霉素 20µl 55µl 15µM 1.5µM
端口B鱼藤酮+抗霉素A 22µl 62年µl 5µM 0.5µM
最终浓度(μM) FCCP集团 井 港口/卷(μL)
低聚糖/ FCCP 1.0/1.0 1.0μM A1-D6(所有) A / 55

注射口加载FCCP浓度滴定分析

如果执行不同类型的XF化验,请参考适当的XF工具箱用户指南和下面的说明为多个注入适当的加载方法的解决方案。

  • 东方安捷伦海马XF测定雷竞技raybet盒。行标签(有学问的a -)。三角缺口将在左下角。
  • 东方安捷伦海马XF测定雷竞技raybet盒。行标签(有学问的模拟)。三角缺口将在左下角。
  • 东方安捷伦海马XF测定雷竞技raybet盒。行标签(有学问的模拟)。三角缺口将在左下角。
  • 将A / D加载引导平试验筒的顶部。东方加载引导字母“A”是位于左上角。用指尖持有的外边缘加载引导加载期间稳定所以吸管技巧不驱逐加载指南。
  • 使用10 - 100μl多通道吸管,确保建议安全地安装到吸管。位置吸管技巧(装满你的化合物注射)所需的列加载指南,和东方建议在一个非常小的角度。插入的技巧尽可能不抵抗到洞和分发。不要强迫技巧完全入洞中。
  • 使用多通道吸管,确保建议安全地安装到吸管。位置的吸管技巧(注入充满你的化合物)45°角。把技巧一半放入注入端口的斜角提示对进样口的对面墙上。
  • 不完全插入技巧的底部注入港口,因为这可能导致复合泄漏通过端口。
  • 轻轻地分发化合物进入港口。撤退的建议仔细港口整个过程,稳定加载引导。
港口布局
XF24港口布局
  • 轻轻地分发化合物进入港口。撤退的建议仔细港口整个过程,稳定加载引导。
  • 避免产生气泡,但不要点击任何部分的墨盒,试图缓解气泡。这可能导致化合物从进样口泄漏。
  • 切换到B / C加载指南。东方以字母“B”的左上角。重复加载过程中概述的步骤3 - 5 ' B ', ' C '和' D '注入端口,使用适当的加载指南。删除和丢弃加载引导(s)。
  • 重复加载过程中概述的步骤上面' B ', ' C '和' D '注入端口。
  • 视觉检查注射端口甚至加载。液体应在港口,确保没有剩余下降筒的顶部。

注射一般信息和指导方针

  • 推荐的注射量是20 - 30μL。
  • 推荐的注射量是50 - 100μL。
  • 推荐注射解卷10倍稀释后注入,从一个微型板块成交量为180μL试验介质:
    • 港口:20μL
    • 端口B: 22μL
    • 港口C: 25μL
    • 港口D: 28μL
  • 推荐注射解卷10倍稀释后注入,从一个微型板块成交量为500μL试验介质:
    • 港口:55μL
    • 端口B: 62μL
    • C端口:69μL
    • D端口:75μL
  • 组成、序列和端口使用的数量将取决于你的试验设计。
  • 自动吸量管筒装入不推荐,因为它们可能导致注入孔泄漏解决方案通过端口。

相关的支持材料

参考资料

海马工具包

只显示信息海马

改变仪器类型

4所示。运行您的XF化验

本节关注执行初始细胞特性使用XF实时ATP率分析仪测定。

本节关注执行初始细胞特性使用细胞能量表型测试分析仪。

本节关注执行初始细胞特性使用XF实时ATP率XF HS迷你分析仪测定。关于执行分析的更详细的信息,请查阅XF HS迷你用户指南。

重要的——在你开始你的XF化验

  • 视觉检查注射端口甚至加载。液体应在港口,确保没有残余滴传感器盒的顶部。
  • 细胞在显微镜下:
    • 确认细胞健康,形态、播种均匀性和纯度(没有污染)。
    • 为贴壁细胞,确保与一致的单层细胞粘附和没有冲走在清洗步骤。
    • 为悬浮细胞稳定,确保细胞粘附后离心、洗涤和孵化。
    • 确保你的背景井不包含细胞。

程序运行试验

  1. 以去,确保XFe分析仪是动力,以连接到XFe控制器(电脑)。您可以验证仪器连接状态在小部件面板左下角的波控制器的软件。
小部件面板
  1. 双击打开所需的分析从模板视图模板文件。如果你的分析模板没有显示在模板视图,将模板使用共享网络驱动器或USB闪存驱动器。
XFe96模板选择图标
XFe24模板选择图标
  1. 回顾组定义后,板图布局和仪器协议,点击开始运行。
审查和运行
审查和运行
  1. 输入您的结果文件的保存位置后(后完成试验),以上的托盘门XFe分析器就会打开。

    重要!开始前校准,确保:

    • 传感器盒适合适当的工具板。
    • 盖子从传感器盒中移除。
    • 适当的方位(方向)上的传感器盒工具板。
  1. 把传感器盒(水化和含有化合物)和公用事业板块在托盘当提示。
  1. 新闻我准备好了启动传感器盒校准。

    时间来完成校准大约是10 - 20分钟(化验在37°C)。XF化验温度执行其他37°C pre-calibration额外的30分钟的时间将被添加到确保准确的数据采集。

    传感器盒校准完成后,控制器将显示负载细胞板对话框。
Load实用程序板提示
  1. 点击打开托盘公用事业板块和加载托盘上的细胞板。以传感器盒仍在XFe分析仪这一步。

    重要!在装货前细胞板,确保:

    • 盖子被移除细胞板。
    • 适当的方位(方向)的细胞板托盘。
校准完成负载细胞板
  1. 把托盘上的细胞板后,点击负载细胞板启动平衡。完成平衡后,试验将自动开始获得基线测量(如你的乐器协议中列出)。
负载细胞板提示
  1. 一旦最终测量仪器协议的命令完成后,波控制器软件将显示卸下传感器盒对话框。
开始试验
  1. 点击喷射当准备喷射传感器盒和细胞板。必要时留出供以后分析(例如-细胞计数归一化)。
完成弹射筒
  1. 把传感器盒和细胞板,后试验完成对话框将会出现。

    点击查看结果立即打开你的化验结果文件,或者点击波家回到Templates视图,并开始以另一种XFe化验。
试验完成
  1. 保存或转移试验结果文件共享网络驱动器或USB驱动器和开放使用波在你的电脑桌面软件进行数据分析。

看到第二章波用户指南以完整的细节XFe分析仪测定操作,包括如何添加/删除测量试验期间,以环境条件XFe化验温度除了37°C,以及更多。

程序运行试验

  1. 一旦所有需要注射端口,墨盒和公用事业板块转移到分析仪和盒式校准开始。

    重要!开始前校准,确保:

    • 传感器盒适合适当的工具板。
    • 盖子从传感器盒中移除。
    • 适当的方位(方向)上的传感器盒工具板。
  2. 墨盒校准完成后,按照软件提示交换工具板的细胞培养板和启动XF化验。

    重要!在装货前细胞板,确保:

    • 盖子被移除细胞板。
    • 适当的方位(方向)的细胞板托盘。
  3. 当你分析完成弹射传感器盒&细胞培养板、必要时留出供以后分析(例如-细胞计数归一化)。
  4. 保存或转移XFd结果文件共享网络驱动器或USB驱动器和开放使用波在你的电脑桌面软件的分析化验数据。

程序运行试验

  1. XFp分析仪主屏幕,触摸开始显示可用分析模板的列表。
XFp开始屏幕
XFp模板选择

如果所需的模板没有地方选项卡,打开或转让模板文件使用共享网络驱动器或USB闪存驱动器。

  1. 在回家的XF HS迷你分析仪看来,联系开始显示可用分析模板的列表。
XF HS开始屏幕
XF HS模板选择

如果所需的模板没有地方选项卡,打开或转让模板文件使用共享网络驱动器或USB闪存驱动器。

  1. 触摸打开试验模板审核模板设计:
    1. 组定义——联系组名称显示注射策略,方法、选择组和细胞类型信息。XFp分析仪软件不允许修改组定义,波必须使用桌面软件。
    2. 板地图——更改分配给一组,首先联系组名称,然后触摸板图。
  2. 触摸一个模板从列表中打开和检查集团定义和板块地图布局:
    1. 组定义——联系组名称显示注射策略,预处理、分析媒体,选择组的细胞类型。修改组定义可以使用安捷伦海马中的修改功能分析。雷竞技raybet
    2. 板地图——改变组分配到一个盘子里地图,第一次触球的组名称列表然后触摸板图。
XFp组定义
XF HS板图
  1. 接触到右箭头(右下角)查看或编辑仪器协议
    • 添加或删除测量周期的仪器协议,联系协议的第一步,然后使用+ / -按钮调整测量周期。
  1. 触摸协议顶部的丝带的XF HS迷你显示查看或编辑仪器协议。
    • 添加或删除测量周期,第一次触球协议命令然后使用+ / -按钮调整测量的循环次数。
仪器协议
XFp协议
  1. 接触到右箭头(右下角)查看或编辑仪器协议。
    1. 新闻编辑旁边试验名称定制你的化验结果文件的名称。
    2. 新闻编辑旁边笔记添加自定义相关分析指出。
    3. 新闻编辑旁边电子邮件通知通知接收者的用户交互(例如,替代效用与细胞板板),并自动发送检测结果文件后完成试验。该功能需要一个活跃的网络连接XFp分析仪。
  1. 触摸审查和运行在顶部的丝带XF HS迷你显示:
    1. 编辑化验结果文件的名字。
    2. 添加注释的分析。
    3. 回顾提醒通知。
    4. 输入一个电子邮件地址从XF HS迷你分析仪接收自动通知用户交互时是必需的,和化验结果的副本文件,当试验已经完成。该特性需要一个活跃的网络连接。
XFp审查
XFp运行
  1. 准备开始XF化验时,点击开始试验。
  1. 把传感器盒(水化和含有化合物)和公用事业板块在托盘当提示。

    重要!在装货前细胞板,确保:

    • 传感器盒适合适当的工具板。
    • 盖子从传感器盒中移除。
    • 适当的方位(方向)上的传感器盒工具板。
XFp负载墨盒
  1. 触摸开始运行当你准备好开始XF化验。
    1. 按照屏幕上的提示加载calibrant效用板和传感器盒(注入水分和装载的化合物)。

      重要!开始前校准,验证:

      • 上的传感器盒适合calibrant工具板。
      • 传感器筒盖被移除。
      • 传感器盒+ calibrant效用板正确放置在托盘上。

      新闻关闭托盘当准备开始校准。

    XF HS运行时加载板对话框
    XF HS运行时校准传感器
    1. 校准完成后XFp分析仪托盘将开放和公用事业板块。删除工具板和加载托盘上的细胞板。

      重要!在装货前细胞板,确保:

      • 盖子被移除细胞板。
      • 适当的方位(方向)的细胞板托盘。
    XFp负载细胞板

    新闻继续当你准备好开始试验。

    1. 校准完成后,按开托盘的校准工具板。删除校准工具板,把托盘上的细胞板。

      重要!在装货前细胞板开始试验,验证:

      • 细胞板盖子被移除。
      • 传感器盒+ calibrant效用板正确放置在托盘上。
    XF HS运行时负载细胞板
    步骤2 XF HS运行时负载细胞板
    1. 把托盘上的细胞板后,联系继续开始平衡。完成平衡后,试验将自动开始获得基线测量(如你的乐器协议中列出)。
    1. 你分析的第一步就是所谓的平衡。平衡完成后,分析仪将开始获得第一个基线测量(如仪器协议中定义)。以上数据显示在视图的中心可以看到当前仪器协议和完成命令。
    XFp概述运行时
    XFp运行时注入
    1. 一旦最终测量仪器协议的命令完成后,删除板和墨盒对话框将会出现。点击继续把传感器盒和细胞板。必要时留出供以后分析(例如-细胞计数归一化)。
    XFp去掉末和墨盒
    1. 一旦最终测量仪器协议已经完成,出版社喷射排出的传感器盒和细胞板XF HS迷你。当托盘完全驱逐,消除传感器盒和细胞板托盘和必要时留出额外的分析(例如-细胞计数归一化)。新闻继续关闭托盘。
    XFp运行时弹射筒
    XFp行动对话框移除细胞板
    1. 保存或转移试验结果文件共享网络驱动器或USB驱动器和开放使用波在你的电脑桌面软件进行数据分析。
    1. 选择一个位置(USB或网络)保存分析结果文件和其他数据文件格式的XF HS迷你,然后单击好吧。登录到你的海马的分析账户和上传XF HS迷你试验数据分析的结果文件。
    XFp保存结果
    XFp行动对话框保存试验结果

    相关的支持材料

    海马工具包

    只显示信息海马

    改变仪器类型

    5。分析XF化验结果

    在分析XF化验结果节中,您将学习如何使用安捷伦雷竞技raybet海马的分析基本的数据分析。海马的分析是一个基于web的软件应用程序,提供了类似桌面互动具有易学易懂的界面,允许您从您的安捷伦以海马XFe分析结果数据,XFp,从任何一台计算机和XF HS迷你分析仪,在世界任何地方。雷竞技raybet只要你有上网,你可以分析与海马海马数据分析。

    为XF96用户请注意:您必须首先转换您的遗留数据文件(文件扩展名.xfd)测定结果文件格式使用桌面软件。遗留数据文件(.xfd)在海马分析无法分析

    如果你正在寻找帮助内容为波桌面和发电机的报告,谢谢点击这里。

    选择一个主题下面了解更多:

    5.1概述

    5.2分析视图

    5.3类型的数据

    5.4数据显示选项

    5.5出口&分享

    5.1概述

    雷竞技raybet安捷伦海马分析海马的数据分析软件分析程序分析仪,使您可以轻松地导入、分析报告,与你的团队分享你的成果或合作者。

    安捷伦海马基本信息分析:雷竞技raybet

    规范 细节
    用于 数据分析
    海马数据文件的选择 XFe96分析结果文件
    XFe24分析结果文件
    XFp分析结果文件
    XF HS迷你分析结果文件
    互联网浏览器兼容性 谷歌浏览器
    Safari
    Mozilla Firefox
    微软的优势
    不提倡使用Internet Explorer
    导出选项 Microsoft Excel (.xlsx)
    Graphpad棱镜(.pzfx)
    图像文件(。JPG和png)

    熟悉海马分析用户界面

    家的观点:

    注册或登录后海马Analytics帐户,你将发现自己家视图(如上图所示)。回到家视图中,单击家左上角的按钮导航带深蓝色。

    1. 数据文件的列表家视图显示最近的五(5)你有进口文件,编辑,和/或接受来自一个文件共享。
    2. 下面的文件列表,你会看到我的分析,你可以指定一个或多个海马XF分析你的资料。
    3. 导入的数据文件家视图中,单击小文件上传按钮在右上角的文件列表。
    沙家的观点

    文件视图:

    单击文件左上角的按钮顶部的暗蓝丝带的应用程序来显示所有数据文件导入到你的海马分析账户。

    1. 在左边的文件任何自定义文件夹视图中,您将看到您已经创建了您的帐户。
    2. 文件的列表和相应的文件元数据(即最后修改日期、仪器类型等)的中间文件视图。
    3. 在右上角的文件视图中,您将看到的文件上传按钮,允许您导入数据文件到你的账户。你会找到的创建文件夹按钮时,将创建一个新的自定义文件夹你可以指定数据文件。你也会找到一个搜索字段允许您执行关键字搜索的数据文件在您的帐户。搜索功能查找关键字匹配的文件名称,类别,最后修改日期和仪器类型。
    沙文件视图

    资源视图:

    点击资源在黑暗的顶级蓝丝带访问一组常用的资源来支持你的安捷伦海马XF安捷伦细胞分析化验工作流程和联系信息支持团队。雷竞技raybet

    资源视图

    设置和用户信息:

    点击小用户帐户图标右上角的深蓝色顶部导航栏来管理您的用户帐户信息,或注销。

    单击设置和用户数据链接显示帐户管理选项,包括:

    1. 检查数量的自由空间来存储数据文件,查看安捷伦隐私政策或删除你的海马分析账户。雷竞技raybet
    2. 重命名或删除您的自定义分析的观点。
    3. 改变你的海马分析帐户密码。
    用户信息
    管理你的账户
    管理你的账户
    管理你的账户

    通知:

    点击小贝尔图标在右上角的深蓝色顶部导航栏显示您的帐户通知。通知告诉你什么时候有人与你共享一个数据文件,或文件共享与另一个用户已被接受。贝尔通知图标将显示一个小红数字对应的数量待通知。请参见分享节有关如何分享的更多信息和接受数据文件。

    通知

    帮助:

    单击问号图标右上角的深蓝色顶部导航栏显示基本的帮助信息。取决于当前屏幕显示的帮助信息在软件当你单击帮助按钮。在分析视图的更多信息,点击帮助当你在分析视图按钮。文件管理功能的更多信息,点击帮助按钮在你的视图文件。

    帮助

    如何导入数据文件吗

    有两种方法可以获取数据文件到您的帐户:(1)手动导入数据文件或(2)接受数据文件与你共享。你可以导入数据文件到你的账户的家和文件视图使用文件上传按钮在右上角的文件列表视图。

    1. 单击文件上传按钮来显示文件上传对话框(见右边)。
      1. 单击选择一个文件文本浏览您的数据文件,或者如果你有文件浏览器打开数据文件,您可以拖放一个文件到这个地区。
      2. 一次导入一个或多个数据文件,您可以看到,2为导入数据文件被选择。
      3. 选择一个自定义文件夹保存数据文件而不是主要的文件列表。你总是可以将数据文件移动到自定义文件夹后进口。
      4. 指定一个类别标签输入新类别的数据文件,或通过点击类别字段显示现有的分类标签。
    文件导入
    1. 点击进口
    2. 海马分析将证实文件成功导入。当你把这个对话框中,您将看到显示导入的文件(s)第一次在文件列表中。
    文件导入

    其他文件管理功能

    右边的每个文件在您的帐户,您将注意到一个小3-dot图标(见下文)。

    附加功能菜单

    单击这个3-dot按钮以显示一个菜单附加文件的功能,其中包括:

    1. 发送到:显示分享对话框输入一个电子邮件地址发送选定的文件。
    2. 删除:删除选中的文件从您的帐户。
    3. 类别:添加或删除分类标签。
    4. 复制:创建一个选中的文件的副本。
    5. 重命名:重命名选定的文件。
    6. 移动到文件夹:选中的文件移动到一个自定义文件夹。
    7. 导出到Excel和GraphPad棱镜:从选定的化验结果导出数据文件到Microsoft Excel或GraphPad棱镜文件。
    8. 下载:选中的文件下载到你的电脑。
    附加功能菜单

    相关的支持材料

    参考资料

    5.2分析视图

    海马分析分析视图是小部件的集合在一个页面(图)。有3种不同的分析视图类-标准分析视图,定制的分析观点,分析和试验装备的同伴的观点。

    • 的标准分析视图包含基本小部件选项,例如动态图,散点图和条形图,用于查看OCR, ECAR,每一系列特定的速度测量或测量速度(即动态图)。
    • 的自定义分析视图列表显示所有包含定制的分析意见用户选择的定义小部件。任何类型的部件可以添加到一个自定义分析视图。
    • 的试验设备的同伴分析视图列表显示分析观点的小部件定义每个视图代表参数选择的安捷伦海马XF化验设备。雷竞技raybet分析工具包同伴分析视图可用于数据分析使用各自生成的文件支持安捷伦海马XF分析工作流和协议。雷竞技raybet

    扩大的观点列表显示的分析观点应用到一个化验结果文件或添加一个新的分析视图(见下文)。

    扩展列表视图

    其他重要的几点:

    • 并不是所有的XF分析工作流可以使用海马分析进行分析。你可以导出你的结果数据Microsoft Excel或GraphPad棱镜为自定义分析的需要。
    • 每个小部件都有自己的板控制画的地图数据的部件。编辑数据,画出小部件通过双击打开插件编辑器视图。图形化数据控制使用该功能在图上面的丝带和使用板图右边的图。文件级的变化去修改视图。
    • 有些时候你想让小修改你的化验结果文件。您可以访问从任何分析视图点击修改功能修改按钮在右上角发现丝带。更改一个文件使用修改将会影响到结果文件中所有部件/分析视图(即删除局外人,改变颜色,或重命名一个集团)。

    空白和自定义分析的观点

    自定义分析视图数据分析特性提供了很大的灵活性。您可以保存任何分析视图的自定义视图,然而这个例子向您展示了如何创建一个定制的视图从一个分析空白视图。下面的一系列步骤也突显出自动化程序步骤分析工作流使用空白/自定义视图功能,改善工作流程的一致性和节省时间。

    1。打开一个化验结果文件并选择标准图形>空白视图并点击添加视图

    自定义视图步骤1

    2。单击添加小部件中,选择标准图形>动态图并点击添加小部件

    自定义视图步骤2

    3所示。在小部件编辑器看来,执行以下步骤:

    1. 切换Y1 >水平显示啊2水平数据
    2. 转背景校正从
    3. 双击小部件的名称和类型:氧气水平数据质量控制
    自定义视图步骤3

    4所示。单击后退箭头返回分析视图。

    5。单击添加小部件+(动态图如下图所示),选择标准图形>动态图并点击添加小部件

    自定义视图步骤4

    6。在小部件编辑器看来,执行以下步骤:

    1. 使用率下拉菜单并选择ECAR
    2. 切换Y1 >水平来显示pH值数据
    3. 转背景校正从
    4. 双击小部件的名称和类型:pH值数据质量控制
    自定义视图步骤5

    7所示。单击后退箭头回归分析的观点。

    自定义视图步骤6

    8。扩大的观点在右侧的菜单并单击分析视图3-dot按钮如图右边的“新观点”分析视图名称。

    自定义视图步骤7

    9。点击保存为自定义视图在一个定制的视图名称和类型(例如数据质量控制视图)

    自定义视图步骤8

    10。下次你导入数据文件进行分析,您可以选择您的自定义数据质量控制视图,节省你的时间从文件创建相同的分析对每个新文件导入。

    自定义视图第9步

    试验设备的同伴分析观点

    XF细胞水压力测试

    计算并显示XF细胞水压力测试分析参数在一个单一的分析观点:

    1. 在添加视图窗口中,单击试验设备的同伴视图扩展列表的列表选项。
    2. 单击XF细胞水压力测试分析视图来显示试验参数的小部件。
    3. 重要的是:XF细胞水压力测试化验与4注射,您必须确定寡霉素注射使用上方的下拉菜单中看到小部件之前,您可以添加这个分析视图。这寡霉素注射计算试验参数选择正确发挥了至关重要的作用;错误的寡霉素注射会导致选择错误的部件的计算和图表。
    4. 选择所需的参数窗口小部件(如基底呼吸、最大呼吸等)添加到你的分析观点。一个蓝色的轮廓在小部件显示被选中。如果急性反应部件是灰色的,那么它不能被选为这个参数只能计算出XF细胞水压力测试化验与急性注入。
    5. 关闭/组的组列表如果有必要,然后单击添加视图
    添加分析视图MST

    还可以添加个人XF细胞水压力测试试验参数小部件(例如呼吸产能)现有的分析观点:

    一个点击。添加小部件红色框圈住按钮(图右)。

    小部件按钮沙

    b。扩大XF细胞水压力测试部件列表,选择所需的部件并单击添加小部件。

    重要的是:XF细胞水压力测试化验与4注射,您必须确定寡霉素注射使用上面的下拉菜单中看到小部件之前,你可以选择小部件添加到你的分析观点。这寡霉素注射计算试验参数选择正确发挥了至关重要的作用;错误的寡霉素注射会导致选择错误的部件的计算和图表。

    添加小部件MST

    下表描述了XF细胞水压力测试试验参数计算:

    添加小部件MST
    试验参数 方程
    Non-Mitochondrial耗氧量 鱼藤酮/抗霉素注射后最低比率测量
    基底呼吸 (第一次注射前的最后速度测量)——(Non-Mitochondrial耗氧量)
    最大呼吸 (最大速度测量FCCP注射后)- (Non-Mitochondrial耗氧量)
    质子漏 (最低比率测量寡霉素注射后)- (Non-Mitochondrial耗氧量)
    atp结合呼吸 (寡霉素注射前的最后速度测量)——(最低比率测量寡霉素注射后)
    多余的呼吸能力 (最大呼吸)——(基底呼吸)
    多余的呼吸能力% (最大呼吸)/(基底呼吸)×100%
    急性反应 (寡霉素注射前的最后速度测量)——(急性注射前的最后速度测量)
    耦合效率 (atp的耦合呼吸)/(基底呼吸)×100%

    XF底物氧化压力测试

    计算并显示XF底物氧化压力测试分析参数在一个单一的分析观点:

    1. 在添加视图窗口中,单击试验设备的同伴视图扩展列表的列表选项。
    2. 单击XF子牛压力测试分析视图来显示试验参数的小部件。
    3. 选择所需的参数窗口小部件添加到你的分析观点。一个蓝色的轮廓在小部件显示被选中。
    4. 可选:FCCP Max率下拉允许您选择使用哪一个计量点FCCP注射后的计算最大呼吸。使用默认选项,海马分析将在每个小组的基础上计算最大呼吸;跨组织的最大响应可能不同(即组1最大响应后的第一个测量FCCP注入与组2最大响应FCCP注入后第三速度测量)。
      你也可以选择一个特定的测量计算的最大呼吸速率和海马分析将使用相同的post-FCCP注射速率测量每组。使用上面的示例中,您可以告诉海马分析计算最大响应所有组使用特定post-FCCP注射速率测量而不是计算最大组内呼吸。
    5. 关闭/组的组列表上如果有必要,然后单击添加视图
    添加分析视图SubOx

    你也可以加入个人XF底物氧化压力测试试验参数小部件(例如最大呼吸)现有的分析观点:

    一个点击。添加小部件红色框圈住按钮(图右)。

    添加小部件按钮沙

    b。扩大XF子牛压力测试部件列表,选择所需的部件并单击添加小部件。

    添加小部件SubOx

    下表描述了XF底物氧化压力测试试验参数计算:

    SubOx生物概要
    试验参数 方程
    基底呼吸 (第一次注射前的最后速度测量)- (Non-Mitochondrial耗氧量*)
    最大呼吸 (最大速度测量FCCP注射后)- (Non-Mitochondrial耗氧量*)
    急性反应 (寡霉素注射前的最后速度测量)——(急性注射前的最后速度测量)
    * Non-Mitochondrial耗氧量 鱼藤酮/抗霉素注射后最低比率测量
    请注意:底物氧化压力测试试验协议相同的试验协议XF细胞水压力测试化验与急性注入,因此您可以获得其他XF细胞水压力测试试验参数(如质子漏,ATP OCR,多余的呼吸能力和non-mitochondrial OCR,等等),从XF底物氧化压力测试数据文件,选择所需的试验参数的添加小部件> XF细胞水压力测试小部件列表。

    XF细胞能量表型测试

    计算并显示XF细胞能量表型试验测定参数在一个单一的分析观点:

    1. 在添加视图窗口中,单击试验设备的同伴视图扩展列表的列表选项。
    2. 单击XF表型细胞能量分析视图来显示试验参数的小部件。
    3. 选择所需的参数窗口小部件添加到你的分析观点。一个蓝色的轮廓在小部件显示被选中。
    4. 关闭/组的组列表上如果有必要,然后单击添加视图
    添加分析视图除了

    还可以添加个人XF细胞能量表型试验测定参数小部件(即代谢潜力)现有的分析观点:

    。点击添加小部件按钮红色框圈住(图右)。

    添加小部件按钮沙

    b。扩大XF细胞能量表型测试,选择所需的部件并单击添加小部件。

    添加分析视图除了

    下表描述了XF细胞能量表型测试试验参数计算:

    除了生物概要
    试验参数 方程
    基线OCR 第一次注射前的最后OCR率测量
    基线ECAR 第一次注射前的最后ECAR率测量
    强调OCR 第一次注射后最大OCR率测量
    强调ECAR 最大ECAR测量在第一次注射
    代谢潜力(OCR) (强调OCR /基线OCR)×100%
    代谢潜力(ECAR) (强调ECAR /基线ECAR)×100%

    XF实时ATP率测定

    遵循以下步骤来计算并显示XF实时ATP率测定参数在一个分析视图。请注意,缓冲系数必须正确配置添加分析视图和小部件从这个分析化验的结果文件。

    1. 在添加视图窗口中,单击试验设备的同伴视图扩展列表的列表选项。
    2. 单击XF ATP率测定分析视图来显示试验参数的小部件。
    3. 为诱导XF ATP率分析(1或2注射前标准注射寡霉素和鱼藤酮/抗霉素A),您必须确定是否寡霉素注射注射注射2或3使用上面的下拉菜单中看到小部件添加分析视图。这寡霉素注射计算试验参数选择正确发挥了至关重要的作用;错误的寡霉素注射会导致选择错误的部件的计算和图表。有关这两个工作流的更多信息请查阅XF实时ATP测定用户手册。
    4. 选择所需的参数窗口小部件添加到你的分析观点。一个蓝色的轮廓在小部件显示被选中。如果小部件(s)是灰色的,这意味着它们不能被选为试验文件没有计算所需的最小数量的注射参数(s)。
    5. 关闭/组的组列表上如果有必要,然后单击添加视图
    ATP分析视图

    你也可以加入个人XF ATP率测定参数小部件(例如ATP产量基底)现有的分析观点:

    一个点击。添加小部件红色框圈住按钮(图右)。

    添加小部件按钮沙

    b。扩大XF ATP率测定小部件列表,选择所需的部件并单击添加小部件。

    重要的是:诱导XF ATP率分析(1或2注射前标准注射寡霉素和鱼藤酮/抗霉素A),您必须确定是否寡霉素注射注射注射2或3使用上面的下拉菜单中看到小部件添加分析视图。这寡霉素注射计算试验参数选择正确发挥了至关重要的作用;错误的寡霉素注射会导致选择错误的部件的计算和图表。

    添加小部件ATP

    下表描述了XF实时ATP率测定参数的计算标准和诱导试验工作流程:

    ATP生物概要

    标准XF实时ATP率测定

    试验参数 方程
    mitoATP产量(基底) [(第一次注射前的最后OCR率测量-最低OCR率测量寡霉素后但在腐烂/ AA注入)x 2 x (P / O)]
    glycoATP产量(基底) 去年glycoPER测量之前第一次注射
    总ATP产量(基底) (mitoATP产量)+ (glycoATP产量)
    XF ATP率指数(基底) (mitoATP产量)/ (glycoATP产量)

    实时诱导XF ATP率测定:

    试验参数 方程
    mitoATP产量(基底) [(第一次注射前的最后OCR率测量-最低OCR率测量寡霉素后但在腐烂/ AA注入)x 2 x (P / O)]
    glycoATP产量(基底) 去年glycoPER测量之前第一次注射
    总ATP产量(基底) (mitoATP产量)+ (glycoATP产量)
    XF ATP率指数(基底) (mitoATP产量)/ (glycoATP产量)
    mitoATP产量(诱导) (OCR平均测量后急性注入和寡霉素注射之前)——(最低OCR率测量低聚糖后与之前腐烂/ AA注入)]x 2 x (P / O)
    glycoATP产量(诱导) 平均glycoATP产量测量后急性注入和下注射之前。
    总ATP产量(诱导) mitoATP产量(诱导)+ glycoATP产量(诱导)
    XF ATP率指数(诱导) mitoATP产量(诱导)/ glycoATP产量(诱导)

    XF T细胞激活试验

    计算并显示XF T细胞活化分析参数在一个单一的分析观点:

    1. 在添加视图窗口中,单击试验设备的同伴视图扩展列表的列表选项。
    2. 单击XF T细胞激活试验分析视图来显示试验参数的小部件。
    3. 检查基线复选框来计算每个数据显示在每个小部件作为基准利率的百分之一(%)测量,这是之前的最后一个速率测量活化剂注入。定量数据,离开基线复选框不计算每单位(pmol /分钟)。
    4. 确保选择正确的注射位置的激活剂注入下拉菜单。
    5. 选择所需的参数窗口小部件添加到你的分析观点。一个蓝色的轮廓在小部件显示被选中。
    6. 关闭/组的组列表上如果有必要,然后单击添加视图
    分析认为T细胞

    还可以添加个人XF T细胞活化试验参数小部件(例如最大速率)现有的分析观点:

    一个点击。添加小部件红色框圈住按钮(图右)。

    添加小部件按钮沙

    b。扩大XF T细胞激活试验,选择所需的部件并单击添加小部件。

    添加小部件T细胞

    下表描述了XF T细胞活化试验参数计算:

    试验参数 方程
    T细胞激活 每(质子流出率)数据显示为动态图
    最大速率 海马计算分析使用非线性最小二乘曲线拟合的算法使用活化剂注入后率测量数据和之前2 dg注入。关于这个计算方法的更多信息,请参考:
    h . j . Motulsky指数高原,GraphPad曲线拟合的向导。2020年5月20日通过。https://www.graphpad.com/guides/prism/8/curve-fitting/REG_Exponential-plateau.htm
    T细胞AUC计算
    曲线下的面积 在海马分析使用率测量数据计算2 dg前的活化剂注入和注入。AUC值仅包括高峰值高于基线。关于这个计算方法的更多信息,请参考:
    h . j . Motulsky如何:曲线下的面积,GraphPad统计指南。2020年5月20日通过。https://www.graphpad.com/guides/prism/8/statistics/stat_area_under_the_curve.htm
    T细胞最大响应计算

    XF糖酵解速率测定

    遵循以下步骤来计算并显示XF糖酵解速率测定参数在一个单一的分析观点。请注意,缓冲系数必须正确配置添加分析视图和小部件从这个分析化验的结果文件。

    1. 在添加视图窗口中,单击试验设备的同伴视图扩展列表的列表选项。
    2. 单击XF糖酵解速率测定分析视图来显示试验参数的小部件。
    3. 为诱导XF糖酵解速率试验(1或2注射前标准注射rontenone /抗霉素A和2 dg),您必须确定注射鱼藤酮/抗霉素A使用上方的下拉菜单中看到小部件之前,您可以添加这个分析视图。这鱼藤酮/抗霉素a注入计算试验参数选择正确发挥了至关重要的作用;不正确的注射鱼藤酮/抗霉素a选择将导致错误的部件的计算和图表。关于这两个工作流的更多信息,请查阅XF糖酵解速率测定用户手册。
    4. 选择所需的参数窗口小部件添加到你的分析观点。一个蓝色的轮廓在小部件显示被选中。如果小部件(s)是灰色的,这意味着它们不能被选为试验文件没有计算所需的最小数量的注射参数(s)。
    5. 关闭/组的组列表上如果有必要,然后单击添加视图
    深刻分析视图

    你也可以添加个人XF糖酵解速率测定参数小部件(例如基底糖酵解)现有的分析观点:

    一个点击。添加小部件红色框圈住按钮(图右)。

    添加小部件按钮沙

    b。扩大XF糖酵解速率测定小部件列表,选择所需的部件并单击添加小部件。

    重要的是:为诱导XF糖酵解速率试验(1或2注射前标准注射rontenone /抗霉素A和2 dg),,您必须确定注射鱼藤酮/抗霉素A使用上面的下拉菜单中看到小部件之前,您可以添加这个分析视图。这鱼藤酮/抗霉素a注入计算试验参数选择正确发挥了至关重要的作用;不正确的注射鱼藤酮/抗霉素a选择将导致错误的部件的计算和图表。

    添加小部件草

    下表描述了XF糖酵解速率测定参数的计算标准和诱导试验工作流程:。

    掌握生物概要

    标准XF糖酵解率测定

    试验参数 方程
    基底糖酵解 去年glycoPER测量之前第一次注射
    基底质子流出速率(每)* 最后每测量之前第一次注射
    % /从糖酵解(基底) (基底糖酵解)/(基底)x 100%
    *表示该参数不被单独报告在海马分析用于计算其他参数值。

    诱导XF糖酵解率测定

    试验参数 方程
    基底糖酵解 去年glycoPER测量之前第一次注射
    基底质子流出速率(每)* 最后每测量之前第一次注射
    % /从糖酵解(基底) (基底糖酵解)/(基底)x 100%
    补充糖酵解 最大glycoPER腐烂后测量/ AA注入
    诱导糖酵解 平均glycoPER诱导试验后测量注入和腐烂之前/ AA注入
    诱导/ * 平均的诱导试验后测量注入和下注射之前
    % /从糖酵解(诱导) (诱导糖酵解)/(诱导)x 100%
    *表示该参数不被单独报告在海马分析用于计算其他参数值。

    编辑数据显示在一个小部件

    定制的数据画一个小部件,双击打开widget-editor视图部件。有不同的方法可以定制数据画为一个特定的小部件。重要的是要记住每个部件的板地图是独立的,这意味着您所作的改变的widget-editor视图将只适用于各自的小部件。

    功能在上面的丝带每个图提供编辑功能具体为小部件类型,如改变速率数据类型,标准化切换开关,或查看数据逐井而不是组平均水平。指的是不同的小部件描述这些功能的更多信息,以及如何使用它们。

    小部件编辑器视图——功能

    板图右边的图可以包含或排除特定试验井从计算和画数据为选定的部件类型。

    小部件编辑器视图——板图

    下面的组列表小部件显示组平均和错误数据为选定的部件类型。你可以双击一个组名称显示或隐藏所有数据在集团的部件图。试验井关闭在盘子里并不包含在地图中看到的值列表。当一群是排除在画数据,该组织将会出现灰见下图的“控制”组。

    小部件编辑器视图——组列表

    分配缓冲因素试验介质和背景井

    一个常见的分析工作流来定义缓冲因素为你分析媒体和背景井一个化验结果文件。需要这个信息来计算质子流出速率(每),计算并显示在许多小部件在海马的几个试验装备的同伴分析视图分析(例如XF T细胞激活试验)。试图分析视图添加到一个化验结果文件没有正确配置缓冲因素将导致一个错误信息(如下图)。一旦缓冲因素恰当地分配给你的媒体和背景井分析结果文件,所需的部件和/或分析视图可以被打开。

    定义缓冲因素1

    步骤来解决错误的缓冲因素——如果你看到上图所示的错误当添加第一个数据文件分析视图,下面从第一步开始。如果你已经有一个分析视图打开数据文件,从第3步开始。

    1. 点击好吧将错误对话框。
    2. 在添加视图窗口中,选择标准视图>快速视图并选择OCR动态图表小部件。
    1. 从分析视图,单击修改(右上角的深蓝色带顶部的应用程序)。
    定义缓冲因子2
    定义缓冲因子3
    1. 单击分析媒体标签确认缓冲因素是分配给你化验传媒集团的定义。如果您没有看到一个缓冲因子值,您可以使用媒体类型下拉菜单中选择正确的雷竞技raybet安捷伦海马XF试验介质。
      这两个海马XF RPMI和DMEM培养基pH值7.4选项将自动分配缓冲因素你的媒体。如果您正在使用自定义分析媒体,您将需要输入缓冲区定制媒体的因素。
    定义缓冲因子4
    1. 单击背景缓冲标签确认缓冲区分配给你的背景因素是井。如果你检查使用默认的男朋友盒子确认使用海马XF RPMI和DMEM培养基,pH值7.4和一个缓冲因素值将自动导入。如果您正在使用自定义分析媒体,您将需要输入缓冲区定制媒体的因素。
    定义缓冲因素5
    1. 单击组标签确认试验中分配给每个分析组。
    定义缓冲因子6
    1. 一旦完成点击保存。一旦完成(或纠正)上面的步骤你应该能够添加你的分析视图(或部件)的数据文件。如果你还看到“您需要定义媒体或背景的缓冲因素组”执行这些步骤之后,请联系安捷伦细胞分析支持:雷竞技raybetcellanalysis.support@雷竞技raybetagilent.com

    相关的支持材料

    参考资料

    5.3类型的数据

    细胞耗氧量(呼吸)和质子排泄(糖酵解)导致快速,轻松地测量细胞外氧的浓度变化和质子。雷竞技raybet安捷伦海马XF分析仪测量细胞外氧浓度的变化和质子在实时。使用海马的分析,您可以轻松地访问和检查以下类型的数据:

    率数据

    率数据是所有海马XF分析仪的主要输出。3种率数据计算在海马&报告分析:

    耗氧速率(OCR):的定量测定耗氧量的样本,因此衡量细胞和线粒体呼吸。单位报告的皮摩尔/分钟(pmol /分钟)和时间。耗氧率(OCR)数据显示在率模式(图右)。当你添加一个动态图分析视图使用添加小部件函数,默认情况下是OCR显示。

    OCR率数据

    重要!un-coated细胞板,建议一般OCR数据范围是:

    1. 背景井:0±20 (pmol /分钟)37°C
    2. 试验井:20 - 16050 - 400在37°C (pmol / min)基线测量。

    请注意这些值一般建议,可以根据试验和/或不同细胞类型进行了分析。

    细胞外的酸化速率(ECAR):定性测量质子挤压的细胞外介质随着时间的推移,报告为milli-pH /分钟(英里/小时/分钟)和时间。细胞外酸化率(ECAR)数据显示在率模式(图右)。您可以显示ECAR widget-editor视图使用动态数据图率下拉菜单控制在动态图。

    ECAR率数据

    重要!un-coated细胞板,ECAR数据的一般范围是:

    1. 背景井:0±10(英里/小时/分钟)37°C
    2. 试验井:10 - 9020 - 120在37°C(英里/小时/分钟)基线测量。

    请注意这些值一般建议,可以根据试验和/或不同细胞类型进行了分析。

    质子流出速率(每):定量测量的细胞外酸化占媒体缓冲能力和板几何。报道皮摩尔/分钟(pmol /分钟)和时间。仅可在跑后试验结果分析。每不计算在试验运行时。你可以在动态图显示每个数据使用widget-editor视图率下拉菜单控制在动态图。

    每率数据

    水平数据

    水平数据被用来计算速率数据和用于数据质量评估,通常XF分析工作流程的第一步。

    氧浓度(O2紧张局势mmHg):细胞(或其他生物材料)消耗氧速率测量周期中,氧气浓度分析媒体将减少。降低氧浓度是用来计算的耗氧率在pmol /分钟(OCR)。您可以显示氧张力水平数据动态图widget-editor视图切换水平为日元上方的动态图。氧张力(O2)数据显示为毫米汞柱与时间(图右)。

    定义缓冲因子2

    重要!建议检查氧张力(O2为每个分析结果文件)水平数据。使用un-coated细胞板开始推荐氧张力(O2)级数据是:

    1. 背景井:152±10(毫米汞柱/分钟)37°C
    2. 试验井:152±10(毫米汞柱/分钟)37°C
    3. 氧张力测量周期结束时不应低于20(毫米汞柱)
    4. 氧张力下一个测量周期之初应该相当于之前的起始氧张力测量(s)。

    请注意这些值一般建议,可以根据试验和/或不同细胞类型进行了分析。

    质子浓度(pH):当细胞(或其他生物材料)挤压速度测量周期中质子,质子浓度测定媒体将会增加。microchamber质子的浓度是衡量整个XF测定和计算细胞外的速度酸化(ECAR英里/小时/分钟)。您可以显示质子浓度水平上的数据动态图首先选择widget-editor视图ECAR使用率下拉菜单,然后切换水平为日元。使用上面的控制动态图。质子浓度(pH)数据显示为pH值和时间(图右)。

    定义缓冲因子2

    重要!建议检查质子浓度(pH值)水平数据为每一个分析结果文件。使用un-coated细胞板,和雷竞技raybet安捷伦海马XF DMEM或XF RPMI介质,pH值7.4,开始推荐质子浓度(pH值)水平数据范围是:

    1. 背景井:7.4±0.1 (pH)在37°C
    2. 试验井:7.4±0.1 (pH)在37°C
    3. 测量周期的末尾的pH值不应低于pH值6.4
    4. 的pH值在开始下一个测量周期应该相当于之前的起始pH值测量(s)。

    请注意这些值一般建议,可以根据试验和/或不同细胞类型进行了分析。

    相关的支持材料

    参考资料

    5.4数据显示选项

    雷竞技raybet安捷伦海马分析提供了一个选择图表类型分析和解释试验结果数据根据类型的分析视图优先。关于创建和定制分析视图的更多信息,请参阅分析视图部分。

    小部件类型

    动态图

    动态图是最常见的方式来显示XF结果数据,你的轴在哪里时间(分钟)和你的轴的速度变化量测量分析物的浓度(O2或H +)。两种类型的数据可以显示在动态图表小部件的轴(1)率数据——耗氧量(OCR),细胞外酸化(ECAR),质子流出(/)和(2)水平数据——氧张力(毫米汞柱),或质子浓度(英里/小时)。

    添加一个动态图窗口小部件:

    使用标准图形> >条形图小部件创建一个条形图的选择率类型(OCR、ECAR /)和测量。

    您可以添加任何分析视图的动态图表小部件海马分析通过单击添加小部件红色框圈住按钮(图右)和选择动态图(中标准图形列表)。

    DAdd部件按钮沙
    动态图表小部件

    注意:还有几个专门的动态图表可以添加到一个特定的定制视图,用于分析XF实时ATP率试验结果数据——mitoATP产量,glycoATP产量和总ATP产量。你可以找到这些小部件通过点击添加小部件和扩大小部件选项的列表XF ATP率测定(图右)。有关数据计算的更多信息在这些动态图,请审核白皮书。

    ATP动态图

    条形图

    条形图是另一种常见的方式来呈现XF数据,帮助用户等常规XF分析确定最优FCCP浓度和细胞播种密度。海马分析提供了各种各样的条形图选项添加到一个分析视图,和许多分析具体。关于特定的条形图widget的更多信息请参考具体分析工具包的同伴或在海马分析分析视图。

    添加一个条形图小部件:

    使用标准图形> >条形图小部件创建一个条形图的选择率类型(OCR、ECAR /)和测量。

    例如,显示OCR的数据率测量10对所有组:

    1. 单击添加小部件按钮
    2. 扩大标准图形列表
    3. 选择条形图
    4. 点击添加小部件
    标准图形条形图

    在小部件编辑器视图,使用率下拉菜单选择率测量10,然后单击后退箭头(小部件编辑器视图左上角)回归分析视图。

    标准grapghs条形图

    能量图

    能源地图小部件是一个X和Y散点图,允许比较两种类型的选择率数据速率测量所有或选定的组。除了下面描述的能源地图部件,有几个额外的散点图小部件选项可以添加到你的分析观点分析类型的依赖和分析中定义的视图部分。

    • 添加一个能源地图部件:

      使用标准图形> >能源地图小部件创建一个耗氧率数据的散点图(OCR)轴,和酸化率数据(ECAR或每)轴,描绘的相对路径利用率为每组选定的速度测量。

      使用测量下拉菜单显示组中的另一个速度测量试验数据。
      使用率下拉菜单改变x轴上的酸化速率(或ECAR);OCR总是显示在轴。
    能源地图部件沙

    精力充沛的地图(基底)

    精力充沛的地图(基底)数据部件是XF ATP率测定中发现小部件列表,可以申请分析标准和诱导工作流的安捷伦海马XF实时ATP率测定。雷竞技raybet有关这两个工作流的更多信息请查阅XF实时ATP测定用户手册。也请注意,缓冲系数必须适当地分配给分析媒体背景井,分析组计算此小部件的数据。

    的精力充沛的地图(基底)小部件情节上的基底mitoATP产量轴,和基底glycoATP产量在x轴上(如下图所示(左)。用于计算此小部件可以在细节中找到添加小部件对话框(图右)。

    精力充沛的地图基底ATP小部件

    XF ATP化验速度超过2注射,您必须确定寡霉素注射使用下拉菜单上添加小部件(图右)之前,您可以将这个小部件添加到你的分析观点。为什么?这寡霉素注射选择中扮演着一个关键的角色在计算正确的基底ATP生产速度,您将看到小部件。不正确的选择寡霉素注射会导致不正确的计算和数据。

    精力充沛的地图基底ATP的细节

    精力充沛的地图(诱导)

    精力充沛的地图(诱导)数据部件也发现XF ATP率测定小部件列表中但只能应用于诱导试验工作流程为安捷伦海马XF实时ATP率测定。雷竞技raybet关于诱导试验工作流程的更多信息请查阅XF实时ATP测定用户手册。也请注意,缓冲系数必须适当地分配给分析媒体背景井,分析组之前你可以计算这个小部件的数据。

    的精力充沛的地图(诱导)小部件情节的诱导mitoATP产量轴,和诱导glycoATP产量在x轴上(图右)。用于计算此小部件可以在细节中找到添加小部件对话框(如下图所示,对吧)。

    精力充沛的映射诱导ATP小部件

    对于3 +注射的XF ATP率分析,您必须确定寡霉素注射使用下拉菜单上添加小部件(图右)之前,你可以将这个小部件添加到你的分析观点。为什么?寡霉素注射选择中扮演着一个关键的角色在计算正确的诱导ATP生产速度,您将看到小部件。不正确的选择寡霉素注射会导致不正确的计算和数据。

    精力充沛的映射诱导ATP的细节

    XF表型细胞能量

    XF细胞能量表型数据小部件在XF表型细胞能量小部件列表和用于分析XF细胞能量的表型测试数据。

    这是一个独特的小部件相比,其他散点图小部件选项在海马分析情节2每组数据点——基线表型和强调表型,用虚线连接称为代谢潜力——轴总是OCR和轴总是ECAR(如下图)。

    有关计算在此小部件的更多信息,请参见添加小部件显示或细节XF细胞能量表型检测组件的用户手册。

    除了能源表型小部件

    除了动态图、条形图和散点图的小部件,海马分析特性两个额外的小部件,是独一无二的标准和/或诱导XF实时ATP率分析工作流。有关这两个工作流的更多信息请查阅XF实时ATP测定用户手册。也请注意,缓冲系数必须适当地分配给分析媒体背景井,分析组之前你可以计算这个小部件的数据。

    堆叠柱形图

    堆叠柱形图表小部件目前XF ATP率测定中发现小部件列表。的ATP产量(基底)小部件创建一个堆叠条形图的基底glycoATP产量(上蓝色栏)和基底mitoATP产量(下图红色栏)为每个组(如下图所示(左)。这个小部件同时适用于标准和诱导分析工作流。

    的ATP产量(诱导)小部件创建一个堆叠条形图的平均诱导glycoATP生产速度(上蓝色栏)和诱导mitoATP生产的平均利率(下图红色栏)为每个组(如下图所示,对吧)。这个小部件只适用于诱导试验工作流程。

    基底ATP堆叠条形图
    诱导ATP堆叠条形图

    XF ATP率指数

    XF ATP率指数目前XF ATP率测定中发现小部件列表。XF ATP率指数部件地块基底mitoATP产量的比例基底glycoATP产量作为空圆圈标记,和情节的比率的平均诱导mitoATP生产率的平均诱导glycoATP生产速度为每个组作为一个实心圆标记(只有当应用到一个诱导试验结果文件——小部件如下图所示显示数据从一个诱导XF ATP率测定)。也请注意,缓冲系数必须适当地分配给分析媒体背景井,分析组之前你可以计算这个小部件的数据。

    XF ATP率测定小部件

    相关的支持材料

    参考资料

    5.5出口&分享

    你的数据导出到一个Microsoft Excel或GraphPad棱镜文件或分享你的结果数据与合作者直接使用海马分析和洞察力。

    数据导出

    有几种方法可以从海马出口数据分析Microsoft Excel, GraphPad棱镜或图像文件。

    导出所有率数据

    您可以创建一个Excel和棱镜文件包含所有数据为选定的文件。这个出口将不包括任何参数计算(例如呼吸产能)计算分析视图,您将需要导出数据分别从每个小部件。

    附加功能菜单

    如何导出所有率数据:

    1. 去文件或家视图。
    2. 单击3-dot按钮右边看到文件的列显示菜单。
    3. 点击导出到Excel或出口到棱镜创建所需的文件。
    4. 使用导出到Excel和出口到棱镜单个文件的选项菜单下找到家和文件视图(绿色突出显示,图右)。
    附加功能菜单

    这是出口功能如何使用?这种类型的数据导出允许用户轻松地转移率所有数据(OCR、ECAR和每)数据转换成棱镜或Excel创建高质量的或定制的数据,进行统计分析和其他分析海马没有提供的功能分析。

    出口选择小部件的数据

    你可以单独部件数据导出到Excel和棱镜文件包含的数据为选定的部件。导出文件中的数据将完全匹配如何格式化的小部件。例如,如果您配置小部件显示基底的呼吸模式,棱镜导出文件将包含个人基础呼吸每组数据值。如果您配置小部件显示基底呼吸在组织模式下,棱镜导出文件将显示值和错误值,平均个人不好的价值观。

    小部件出口个人

    如何导出所有率数据:

    1. 从任何分析视图或部件编辑器视图,寻找小云按钮在右上角的小部件。
    2. 移动你的鼠标移到云按钮来显示图像和数据导出选项。
    3. 滑动你的鼠标图像导出您的小部件作为一个PNG或者JPG文件,或数据导出您的小部件作为一个Excel或棱镜文件。
    4. 导出文件中的数据将完全匹配您如何格式化您的小部件。在这个例子中,棱镜导出文件包含基础呼吸值每对两组板。
    小部件出口棱镜

    这是出口功能如何使用?这种类型的数据导出允许用户轻松地选择率或参数数据导出为一个图像文件,或作为一个棱镜或Excel文件。棱镜和Excel导出让你得到你想要的数据进一步分析(即创建高质量的或定制的数据,进行统计分析和其他分析海马没有提供的功能分析),而不是出口的所有数据和试图找到你所需要的特定信息。

    文件共享

    你可以与合作者分享个人化验结果文件或你的团队使用内置的文件共享特性。的分享功能是发现小3-dot菜单下每个试验结果文件的权利家和文件视图(图右)。

    共享数据附加功能菜单

    点击发送到显示一个对话框,输入收件人的电子邮件地址,并点击发送发送您的数据文件。如果收件人没有海马分析账户,他们必须创建一个视图数据文件。如果对方有一个帐户,他们将收到电子邮件通知文件与他们分享。他们还将看到一个通知在海马分析(贝尔图标在右上角),他们将接受(或拒绝)的共享文件。

    发送到对话框

    如何使用这个共享的特性?分享功能允许你发送一个化验结果文件的人,或没有,海马分析账户直接通过应用程序。化验结果文件您选择共享将创建一个数据文件的副本在收件人的帐户,和小部件的布局、选择和分析视图将显示如何格式化之前文件共享。接收者可以修改共享文件,但你的那一份文件将保持不变。

    相关的支持材料

    参考资料

    海马工具包

    只显示信息海马

    改变仪器类型

    本节重点查看和分析试验结果数据使用波发生器软件桌面和报告。

    波桌面数据分析软件生成的结果文件的任何XF, XFe XFp分析仪。复杂的细胞代谢数据转换成可发表的结果使用波桌面的灵活的分析观点,嵌入式报表工具,和其他强大的分析功能。

    XF报告生成器Microsoft Excel宏的文件自动计算每个海马XF试验装备的参数和现在的结果数据在一页纸,可定制的总结报告。

    选择一个主题下面了解更多:

    5.1规格和兼容性

    5.2类型的数据

    5.3数据显示选项

    5.4分析视图

    5.5 XF报告生成器

    5.1规格和兼容性

    波桌面所有海马的试验设计与数据分析软件分析和支持:

    • 分析数据文件从所有海马分析仪(XFe96、XFe24 XFp, XF96和XF24)。
    • 为XFe96创建和定制分析模板,XFe24 & XFp分析仪。
    • (1)Microsoft Excel导出数据,(2)GraphPad棱镜,或(3)XF报告发电机。
    • 支持Microsoft Excel(32和64位)为Windows和Macintosh电脑。

    它总是鼓励更新最新版本的桌面软件。波桌面软件的最新版本是2.6.1(2019年4月)。波桌面软件可以安装在任何PC与Windows 7操作系统或更高版本。

    下面你会发现电脑规格和波桌面2.6软件兼容性的细节:

    电脑 规范
    Windows电脑 操作系统:Windows 7、8.1和10
    处理器:英特尔酷睿i3(或更好的)
    硬盘空间:175 GB
    系统内存(RAM):4 GB(最小值*)
    屏幕分辨率:1280 x 800(最小)
    支持的Excel版本:2010年、2013年和2016年
    麦金塔电脑(需要使用虚拟机) 操作系统:Mac OSx 10.11或更高版本
    虚拟机:相似之处12 & Windows 7, 8.1和10
    处理器:英特尔酷睿i3(或更好的)
    硬盘空间:175 GB
    系统内存(RAM):4 GB(最小值*)
    屏幕分辨率:1280 x 800(最小)
    支持的Excel版本:2011 & 2016

    *为最优软件经验,8 GB(或更高版本)建议系统内存(RAM)。

    相关的支持材料

    参考资料

    5.2类型的数据

    细胞耗氧量(呼吸)和质子排泄(糖酵解)导致快速,轻松地测量溶解氧的浓度变化和自由质子。雷竞技raybet安捷伦海马XF分析仪实时测量溶解氧浓度和自由质子通过隔离极其体积小(约2μL)中等以上的单层细胞在一个微型板块然后计算OCR和ECAR,分别。

    使用波桌面软件,您可以轻松地访问和检查这些数据:

    率数据是主要的XF分析器的输出。

    耗氧速率(OCR):定量测量的耗氧量,线粒体呼吸的一个指标,在皮摩尔/分钟(pmol /分钟)和时间。

    耗氧率(OCR)数据显示在率模式(右)

    OCR率数据

    细胞外的酸化速率(ECAR):定性测量质子挤压的细胞外介质,报告为milli-pH /分钟(英里/小时/分钟)和时间。

    细胞外酸化率(ECAR)数据显示在率模式(右)

    ECAR率数据

    质子流出速率(每):定量测量的细胞外酸化占媒体缓冲能力和板几何。报道皮摩尔/分钟(pmol /分钟)和时间。仅可在跑后化验结果,而不是在分析运行时。

    每率数据

    见第三章波用户指南更多信息在波软件可用的类型的数据。

    级数据被用来计算速率数据,也可以用于诊断目的。

    氧浓度(毫米汞柱):当细胞(或其他生物材料)测量期间消耗氧气,氧气张力将减少。这减少氧张力用于计算耗氧率(OCR)。您可以查看氧张力水平上的数据概述分析视图使用日元的下拉菜单。

    氧张力(O2)数据显示为毫米汞柱与时间水平模式(右)

    O2水平数据

    质子浓度(英里/小时):当细胞(或其他生物材料)产生质子在测量中,质子浓度会增加。microchamber自由质子的浓度是衡量整个XF测定和计算细胞外的速度酸化(ECAR)。您可以查看英里每小时级别上的数据概述分析视图使用日元下拉菜单。

    质子浓度(英里/小时)的数据显示在水平模式(右)

    ph值数据

    相关的支持材料

    参考资料

    5.3数据显示选项

    波提供了一组标准的绘图选项来查看和解释试验结果数据。根据分析视图的类型选择,波自动计算和图形结果数据为以下之一:

    动态图

    动态图是最常见的方式从XF分析仪显示率数据。动态图形显示的速度在轴,轴和时间。在试验过程中,数据获取和实时绘制动态图。动态图表中可以找到快速查看和分析意见波软件概述。

    OCR动态图

    能量图

    图XF结果数据的另一个常见的方式是一个能量图(散点图),在那里耗氧速率(OCR)总是绘制轴,和酸化数据(ECAR或每)总是在x轴上。使用测量下拉菜单中选择测量速度为每组显示地图上的能量。使用下拉菜单来改变速率每轴率。的能量映射图选项中可以找到快速视图和OCR和ECAR分析观点。

    散点图

    板图

    板地图显示率数据为选定的速度测量的试验。板总是显示在地图右上角的波在运行一个分析,快速视图,概述和OCR和ECAR分析观点。快速视图有一个按钮来显示板图,默认隐藏。

    的板图在快速视图和OCR和ECAR分析视图显示两个利率:耗氧速率(OCR -前)和酸化数据(ECAR或每-底部)。的板图在概述分析视图显示1率- OCR, ECAR或每。

    板图

    当打开一个新的分析来看,板图默认显示的数据率测量1。使用下拉菜单将显示另一个速度测量的试验数据。

    条形图

    的条形图可以在概述只分析视图(以下板块地图),并显示每组的平均速度为选定的测量。使用显示下拉菜单来改变显示率从集团(平均)(个人)模式。

    的条形图可用于识别异常值,优化FCCP浓度、最佳细胞播种密度,或其他趋势可能不会明显当测量数据绘制动态图或散点图。

    条形图

    组列表

    的组列表是传说中的数据绘制动态图和散点图。

    组列表

    使用组列表:

    • 隐藏或显示组的画数据通过双击组名称。
    • 检查细节盒子在组列表的右上角显示组统计信息。统计数据显示,平均和错误的选择率测量。选择一个不同的速度测量显示组统计率。
    • 试验井了从地图上的盘子不包括在计算组统计数据。
    • 当一群是隐藏的,群体的平均值和标准偏差会:意思是:0.00;标准偏差:0:00。

    见第三章波用户指南更多信息在波软件可用的类型的数据。

    相关的支持材料

    参考资料

    5.4分析视图

    有4个可定制的分析观点,可以添加到一个化验结果文件在桌面。每个分析视图可以被添加到一个化验结果文件多次使用添加视图菜单按钮顶级丝带。

    快速视图

    快速视图是默认分析视图打开时显示一个新的分析结果文件。同时快速视图显示一个动态图的OCR和时间,ECAR vs时间,和一个能量OCR和ECAR地图。

    快速视图

    概述

    概述显示一个动态图率(OCR、ECAR /或PPR)与时间。上显示的选择率轴,时间是显示在轴。组统计信息(平均率和错误)为每个测量可以通过检查显示细节盒子的组列表以下动态图。概述是最多才多艺的分析视图为常规分析波软件功能。来显示概述,点击添加视图并选择概述从视图的列表。

    提示:添加多个观点概述分析重复的过程添加视图>概述。这给了更大的灵活性,裁剪结果数据呈现给特定群体,反应,或对比组。

    概述分析视图

    OCR和ECAR

    OCR和ECAR视图显示一个能量的地图光学字符识别轴和(默认)ECAR在x轴上。使用下拉菜单来改变率率轴上显示每或PPR。OCR总是显示在轴,无法改变。来显示OCR和ECAR,点击添加视图并选择OCR和ECAR从视图的列表。

    OCR vs ECAR分析视图

    数据

    的数据视图包含与试验的结果相关联的所有数据文件组织到7选项卡:

    • 组数据:平均利率数据(OCR、ECAR /或PPR)和错误为每个组,由测量的数字。
    • 率:个人好率数据(OCR、ECAR /或PPR)下令测量数量。误差值不显示。
    • 数据层:个体水平的数据(O2和pH值)下令测量数量。
    • 生:原始测量数据,包括O2和pH发光值,参考价值,和每个测量环境温度记录。这个标签是由技术支持最常用的,不是常规数据分析。
    • 校准:O2和pH值校准结果组织。
    • 校准的观点:O2和pH值校准结果分析显示为一个板块地图。
    • 事件日志:分析信息,如分析仪序列号,软件版本,板&条形码数字,在试验和其他设置。还提供了使用的协议命令是一个合适的表XF试验期间,包括命令名,时间,和结果。

    来显示数据视图中,单击添加视图并选择数据从视图的列表。组数据选项卡显示默认打开的时候数据视图。

    数据分析视图

    见第三章波用户指南更多关于每个分析视图的详细信息,包括重新计算数据的%基线,正常化率数据生物参数(如手机号),国旗试验井在盘子里地图,和其他关键的分析功能和特性。

    相关的支持材料

    参考资料

    5.5 XF报告生成器

    雷竞技raybet安捷伦海马XF报告生成器Microsoft Excel宏的文件自动计算每个海马XF试验装备的参数和现在的结果数据在一页纸,可定制的总结报告。

    波提供了一键直接导出的结果数据XF报告生成器,任何修改在波你的结果数据,例如排除试验井或标准化率数据,将被纳入到出口&分析报告生成器Excel文件。单击出口按钮顶级丝带菜单显示的列表可用XF报告生成器导出选项。

    为什么使用XF报告发电机?

    • 更有效和一致的数据分析-原始运动数据转换成可判断的结果减少和消除重复的手工计算和数据。
    • 总结XF结果数据在几秒钟内——数据表示为一个有组织的、可定制的容易理解的报告。
    • 可伸缩来满足你的分析需求,导入和分析5复制结果文件同时使用多文件XF报告生成器。
    • 简单协作——审查和重新分析结果数据在报告中发电机没有任何特殊的软件程序或许可证。
    • 支持的分析:
      • 上生成数据文件,以海马XFe XF XFp分析仪。
      • Microsoft Excel 2010、2013和2016年在Windows个人电脑。
      • Excel为苹果电脑Mac 2011年和2016年。
    XF报告生成器-下载页面 单文件分析 多文件分析
    海马XF细胞能量表型测试 一列纵队用户指南 多文件用户指南
    海马XF细胞水压力测试 一列纵队用户指南 多文件用户指南
    海马XF实时ATP率测定 一列纵队用户指南 不可用
    海马XF糖酵解率测定 一列纵队用户指南 多文件用户指南
    海马XF水燃料反复弯曲试验 一列纵队用户指南 不可用
    海马XF糖酵解压力测试 一列纵队用户指南 不可用

    相关的支持材料

    参考资料

    海马工具包

    只显示信息海马

    改变仪器类型

    6。除了基础知识

    XF学习中心的这个部分将提供一个使用XF分析仪介绍各种话题,包括一系列XF分析工具和应用程序,选择试验条件和样品类型,以及标准化和XF数据的分析。

    选择一个主题下面了解更多:

    6.1 XF工具和应用程序

    6.2标准化解决方案

    6.2脂肪酸氧化

    6.3 Permeabilized细胞& Iso水户

    6.3 Permeabilized细胞& Iso水户

    6.4缺氧和球状体

    6.4缺氧和胰岛

    6.1 XF化验和应用程序

    雷竞技raybet安捷伦XF分析工具和试剂开发专门为每个XF分析仪使用确保可靠性和一致性的结果。海马XF工具和试剂帮助简化运行提供pre-calibrated XF试验,测量预应力试剂有价值的功能代谢参数包括细胞ATP生产速度,线粒体功能、糖酵解活性和在活细胞底物氧化,permeabilized细胞线粒体和孤立。

    下面的材料提供信息和方法来执行一系列XF化验。

    细胞ATP生产

    线粒体功能

    线粒体基质的氧化

    糖酵解作用

    免疫细胞激活化验

    线粒体基质的偏好

    代谢表型出现

    6.2标准化解决方案

    是否比较不同细胞类型,基因改造或复合治疗,功能正常化生物数据是一个关键的组件在工作流执行XF化验和/或后续XF数据的分析和解释。正常化XF化验可以应用在多个水平,包括细胞数量,基因组DNA,细胞总蛋白。

    下面的材料提供信息的规范化方法XF数据给你。

    6.3 Permeabilized细胞线粒体和孤立

    线粒体功能的研究是临床和基础科学研究的核心。安捷伦海雷竞技raybet马XF细胞水压力测试提供了一个初始的线粒体生物能量学概要文件。然而,研究精确的酶或路径驱动观察到的变化可以进一步提供额外的洞察力和特定意义改变代谢酶与疾病状态。

    传统方法研究底物氧化涉及分离线粒体,和XF分析支持高通量分析能源需求和衬底的可用性可以严格控制机械的研究使用最少的quantitiues孤立的线粒体。

    然而,有几个缺点当分离线粒体,包括有限数量和偏见源于线粒体在隔离的sub-selection或损坏。XF质膜Permeabilizer (PMP)在贴壁细胞的质膜形成毛孔线粒体膜不会造成任何的伤害。这种试剂克服了与使用相关的挑战与完整细胞线粒体或substrate-supplemented媒体。

    Permeabilized细胞

    孤立的线粒体

    6.4缺氧和球状体

    6.4缺氧和胰岛

    分析仪测量新陈代谢的能力降低了氧环境(缺氧),以及某些类型的三维样本,包括小岛。分析仪测量新陈代谢的能力降低了氧环境(缺氧),以及某些类型的三维样本,包括球状体。分析仪测量新陈代谢的能力降低了氧环境(缺氧)。

    缺氧

    球状体

    小岛

    海马工具包

    只显示信息海马

    改变仪器类型

    需要更多的信息吗?

    商店在线商店购买墨盒,盘子,工具包,媒体,和你XF化验试剂。浏览所有的完整列表海马细胞分析可消耗的产品XFe96。

    在线商店

    商店在线商店购买墨盒,盘子,工具包,媒体,和你XF化验试剂。浏览所有海马细胞分析的完整列表XFe96可消耗的产品。

    买XF化验

    取得联系

    接触一个安捷伦海马XF代表安排一个示范,看雷竞技raybet看安捷伦海马XF分析器可以解决你的研究的需要。

    请求一个演示

    全球技术支持

    电子邮件:

    cellanalysis.support@雷竞技raybetagilent.com

    美国和加拿大

    1-800-227-9970;选择选项3然后8

    欧洲

    英国:0800 096 7632

    德国:0800 180 66 78

    荷兰:0800 022 7243

    其他欧盟:+ 45 3136 9878